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高中生物选修一 专题四课题3 酵母细胞的固定化(第2课时)自贡一中 章春容自贡市熊硕生物名师工作室 ZIGONGSHI XIONGSHUO SHENWU MINGSHI GONGZUOSHI
要点回顾什么是固定化酶和固定化细胞技术? 利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。 包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。
04实 验 设 计SHI YAN SHE JI
(一)制备固定化酵母细胞(二)用固定化酵母细胞发酵四.实验设计
阅读教材P50回答下列问题(一)制备固定化酵母细胞2.海藻酸钠加热时应注意什么?为什么?1.酵母细胞活化的含义是什么?4.海藻酸钠和酵母细胞混合液加入CaCl2溶液要注意什么?CaCl2溶液作用是什么?3.海藻酸钠溶液为何要冷却至室温后再加入已活化的酵母?5.制备固定化酵母细胞分为哪几个步骤?你认为最重要的是哪个步骤? 避免海藻酸钠焦糊 避免杀死酵母细胞 使混合液形成稳定的结构即凝胶珠 制备海藻酸钠溶液如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法: 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。
观察凝胶珠的颜色和形状二者都说明制作失败,需要再次尝试 若凝胶珠颜色过浅、呈白色说明海藻酸钠浓度低,固定的酵母细胞数目少 若形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形:说明浓度偏高你认为最关键的步骤是哪一步?结果分析与评价 故制备海藻酸钠溶液是最重要的环节
(二)用固定化的酵母细胞发酵阅读教材P51回答下列问题2.葡萄糖的作用是什么?1.为什么要用蒸馏水冲洗凝胶珠?洗去CaCl2溶液既是发酵底物也是酵母菌的营养物质3.如何检测发酵是否成功?(1)观察气泡(2)闻气味还有其它方法检测吗?
酵母细胞活化配制CaCl2溶液配制海藻酸钠溶液将海藻酸钠溶液与酵母细胞混合固定化酵母细胞冲洗凝胶珠发酵
五.结果分析与评价(一)观察凝胶珠的颜色和形状(二)观察发酵的葡萄糖溶液凝胶珠颜色过浅、呈白色:说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少凝胶珠不是圆形或椭圆形:说明海藻酸钠的浓度偏高。 二者都说明制作失败,需要再作尝试。利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多气泡,同时会闻到酒味
课题小结成本低,操作更容易固定化酶的应用技术固定化细胞技术实验操作制备固定化酵母细胞用固定化酵母细胞发酵方法优点方法缺点优点缺点步骤结果分析评价操作注意事项步骤结果分析评价操作注意事项酵母细胞固定化实例物理吸附法、化学结合法实例一种酶只能催化一种化学反应能与反应物接触也能分离,可反复利用高果糖浆的生产与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降等固定化酵母细胞基础知识包埋法
课堂检测(1分钟后公布答案)2. 制备固定化酵母细胞的过程中错误的是( ) A、取干酵母,加入蒸馏水,使其活化 B、配制海藻酸钠时,加热用大火,直到海藻酸钠溶化为止 C、将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的酵母细胞 D、将凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30 min左右B
课堂检测(1分钟后公布答案) ( )
5.下列关于酶和细胞的固定叙述不正确的是( )A.酶分子很小,易采用包埋法 B.酶分子很小,易采用化学结合或物理吸附法固定的酶C.细胞体积大,难被吸附或结合 D.细胞易采用包埋法固定6.固定化细胞对酶的活性影响最小,根本原因是 ( )A.避免了细胞破碎、酶的提取纯化过程 B.固定化细胞在多种酶促反应中连续发挥作用C.促化反应结束后,能被吸收和重复利用D.细胞结构保证了各种酶在细胞内化学反应中有效的发挥作用DA课堂检测(1分钟后公布答案)
①活化酵母细胞:称取定干酵母与定量蒸馏水混合并搅拌,使酵母细胞活化;②配制CaCl2溶液:将无水CaCl2溶解在定量蒸馏水中,配制成一-定浓度的CaCl2溶液;(3)③配制海藻酸钠溶液:将定量的海藻酸钠直接溶解在定量的蒸馏水中大火加热,配制成溶液;④海藻酸钠溶液和酵母细胞混合:将活化的酵母细胞迅速加入刚配制成的海藻酸钠溶液中,充分搅拌混合均均;⑤固定化酵母细胞:用注射器以恒定的速度缓慢将海藻酸钠和酵母细胞混合液加入CaCl2(1)请找出并改正其中的两处错误(2)如果凝胶珠颜色过浅呈白色,则说明海藻酸钠的浓度 (填过高或过低)a.海藻酸钠应小火或间断加热;b.海藻酸钠要冷却后再加入活化后的酵母细胞 7.某小组固定酵
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