遗传学实验教学大纲.doc

遗传学实验教学大纲 实验课程编号课程名称：遗传学 课程属性：必修 实验属性：非独立设课 开课学期：3 学时：16 适用专业：农学 学分：3.5 开课部门：生命科学与资源环境学院 考核要求：实验操作加实验报告 课程简介： 遗传学实验课有助于巩固、加深理解遗传学理论内容、验证理论规律、提高分析问题、解决问题和动手能力；通过本实验课程的学习，要求学生结合遗传学理论课程的内容，掌握相应的遗传学知识，掌握所做实验的基本原理及实验过程中操作的关键步骤，能独立完成类似的实验内容，初步养成实验、科研的良好习惯；培养学生科学、严谨、实事求是的学风，提高学生的动手能力、分析问题解决问题的能力以及创新性思维。 一、实验项目设置及学时分配 项目编号 实验项目名称 实验 类型 开出 要求 学时 分配 001 ?秋水仙碱处理植物染色体加倍实验 验证性 必做 4 002 植物花粉母细胞减数分裂现象观察 综合性 必做 4 003 植物根尖压片法观察细胞有丝分裂过程 综合性 选做 4 004 果蝇形态、生活史观察???果蝇的杂交试验? 综合性 选做 4 学时总计 16 二、实验内容及教学要求 实验项目1： 秋水仙碱处理植物染色体加倍实验 1、教学内容 秋水仙素处理 （1）浸渍法 此法适合于处理种子，枝条盆栽小苗的茎段生长点。 一般，选干种子或萌动种子，将它们放于培养器内，再倒入一定浓度的秋水仙素溶液，溶液量为淹没种子的2/3为宜。处理时间多为24小时，浓度0.2%～1.6%。浸渍时间不能太长，一般不超过6天，以免影响根的生长。最好是在发根以前处理完毕。处理完后应及时用清水洗净残液，再将种子播种或沙培。对于百合类植物，常采二倍体鳞片浸于0.05%～0.1%的秋水仙素溶液，处理1～3小时后洗净扦插。唐菖蒲实生小球也可用浸渍法促使染色体加倍。 盆栽幼苗，处理时将盆倒置，使幼苗顶端生长点浸入秋水仙素溶液内，以生长点全部浸没为度。对于组织培养试管苗也可采用浸渍法处理，只是处理时须用纱布或湿滤纸覆盖根部，处理时间因材料可从几个小到几天。对插条，一般处理1～2天。 （2）滴定法 用滴管将秋水仙素水溶液滴在子叶、幼苗的生长点上（即顶芽或侧芽部位）。一般6～8小时滴一次，若气候干燥，蒸发快，中间可加滴溜馏水一次，如此反复处理一至数日，使溶液透过表皮渗入组织内起作用。若水滴难以停留在芽处，则可用棉球包裹幼芽，再滴芽液处理。此法与浸种法相比，可避免植株根系受到伤害，也比较节省药液。 （3）毛细管法 将植株的顶芽、腋芽用脱脂棉或纱布包裹后，将脱脂棉与纱布的另一端浸在盛有秋水仙素溶液的小瓶中，小瓶置于植株近旁，利用毛细管吸水作用逐渐把芽浸透，此法一般多用于大植株上芽的处理。 2、教学目标 （1）了解秋水仙素使植物细胞染色体加倍的基本原理。 （2）熟悉实验步骤和实验过程。 （3）掌握秋水仙素处理的各种方法。 实验项目2： 植物花粉母细胞减数分裂现象观察 1、教学内容 取材：选取适当大小的花蕾，是观察花粉母细胞减数分裂的关键性步骤。不同植物取材时期不同。 固定：取下的材料应立即放入固定液中杀死固定。在4～15℃条件下，一般固定时间为24小时。固定后的材料先用95%酒精漂洗至无醋酸气味，再移到70%酒精中置于冰箱内保存。常用的固定液是法氏固定液，在使用这种固定液时应注意现配现用，固定时不要在阳光下暴晒。 染色和压片：先将已固定的材料置于培养皿内并倒入少许保存液。用镊子摘取一个适当大小的小穗或花蕾放在吸水纸上吸掉多余的酒精，然后放在载玻片中央。用解剖针挑出2～3个花药，并立即滴醋酸洋红或醋酸铁矾苏木精染色液于花药上。用解剖针将花药横向切断，并从一端向切口轻轻挤压花药，使花粉母细胞从切口处逸出。然后用镊子除尽花药壁等杂物。这是压片优劣的关键步骤之一，如不去净残渣，则不容易把分裂的细胞压平，使染色体不容易分散开，并且在制作永久片的过程中，细胞会从载玻片上大量脱落。去净残渣后，在低倍镜下进行初步镜检，如果花粉母细胞处于减数分裂时期，即可加上盖玻片。加盖玻片时，先使盖玻片的一边放在载玻片上，待染液布满整个边缘时，左手握镊子顶住盖玻片，右手握解剖针托住盖玻片轻轻放下。加上盖玻片以后，如有多余染色液，可用吸水纸吸去；如染色液不能布满盖玻片，则在盖玻片一边稍加染色液，然后在酒精灯上烤片。烤片时，用手平持片子在酒精灯上方来回移动，并经常将片子放在手背上试温，以片子不烫手为宜，可反复进行多次。烤片是制片过程中的一项很重要的步骤。通过烤片可使细胞质颜色变浅，而染色体能得到充分鲜明的着色。烤片以后可在盖玻片上加一小块吸水