微生物学实验二培养基配制相关器皿的包扎及.pptxVIP

微生物学实验二培养基配制相关器皿的包扎及; 实验二培养基配制、相关器皿的包扎及消毒灭菌;本次实验的目的和要求;内 容 一培养基及无菌水的制备;一、培养基的相关知识介绍;2、培养基制备原则和方法;3、物理化学条件适宜的说明;4、培养基的分类;（3）按培养基对微生物的功能分 基础培养基：含有一般微生物生长繁殖需要的基本营养物质。 选择性培养基：根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。“投其所好、取其所抗”。——高通量筛选的建立。 鉴别性培养基：在培养基中加入有能与目的菌的无色代产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。——直观、专一性（伊红美兰培养基，EMB）;大肠杆菌在EMB培养基上的形态;二、培养基的配方;1、牛肉膏蛋白胨培养基 （分离、培养细菌用）——500ml/组; 可溶性淀粉 20g NaCl 0.5g KNO3 1.0g K2HPO4·3H2O 　　0.5g MgSO4·7H2O 0.5g FeSO4·7H2O 0.01g 琼脂 15～25g 水 1000ml pH 7.4～7.6 临用时无菌操作在800ml培养基中加入3%的K2Cr2O7溶液1ml;KH2PO4 1 g MgSO4·7H2O 0.5 g 蛋白胨 5 g 葡萄糖 10 g 琼脂 20 g 水 1000ml pH 6.0 配好后在此培养基中，按1000ml加入1%孟加拉红水溶液3.3 ml。 临用时以无菌操作在100ml培养基中加入1%的链霉素0.3ml，使其终浓度为30ug/ml。 ;三、培养基配制的步骤;2、称量、溶解 按培养基配方在三角瓶中先加水（如无加入后大幅度改变原体积的物质，可以把水加足），然后依次准确称取各药品并分别逐一溶解于其中（琼脂需加热溶解），最后补充水到所需体积。 （注意：各成分之间发生化学反应产生不溶的沉淀；培养基成分中有影响pH试纸的显色的物质，调pH值后再加入）;3、调pH 用5~10%NaOH、1~5%HCl溶液将培养基的pH调到所需范围，根据需要用精密pH试纸或pH计来确定。 4、包扎 （有一定规范要求） 5、灭菌 （高压蒸汽灭菌：121.3℃,15～30min） ;四、培养基配制过程中需注意的事项;五、培养基配制中的2点说明;六、无菌水的准备;注意！！;内 容 二消 毒 与 灭 菌;一、消毒、灭菌的定义和常见方法;高温灭菌或消毒的方法 ;过滤除菌技术（正压和负压之分）;膜过滤装置;不耐热的液体培养基的除（灭）菌;膜过滤装置;细菌截留于膜过滤器滤膜表面;二、加热灭菌的方法;三、干热灭菌;干热灭菌需要注意的事项;四、高压蒸汽灭菌锅的结构及使用;高压蒸汽灭菌的原理;典型的高压蒸汽灭菌锅纵剖面结构;卧式灭菌锅示意图（简图）; 立式压力灭菌器;手提式灭菌锅;卧式矩型和圆型压力蒸汽消毒器;第40页/共55页;高压蒸汽灭菌过程：;空气排除度对灭菌温度的影响;一些细菌芽孢湿热灭菌所需时间;消毒、灭菌的生物指示菌;高压蒸汽灭菌效果的监测方法（3种）;五、实验室常用灭菌方法;内 容 三相关器皿的包扎方法;一、器皿包扎的作用;二、相关器皿的包扎要求;三、包扎中的几点说明;四、利用吸管筒（铜制或不锈钢制）包扎吸管灭菌;不锈钢吸管筒、培养皿筒;本次实验完成的内容;思考题;感谢您的欣赏