农业农村部公告第197号-2-2019CN.docx

ICS 65.120 B 46 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 农业农村部公告第197号—2-2019 饲料中盐酸沃尼妙林和泰妙菌素的测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of valnemulin hydrochloride and tiamulin in feeds— Liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2019-08-01 发布 2020-01-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 农业农村部公告第197 号 — 2 2019 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出， 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC 76)归口 本标准起草单位：浙江大学饲料科学研究所。 本标准主要起草人：王凤芹、汪以真、路则庆、余东游、王新霞、单体中、冯杰、刘波静、杜华华。 工 1 农业农村部公告第197号—2—2019 饲料中盐酸沃尼妙林和泰妙菌素的测定 液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了饲料中盐酸沃尼妙林和泰妙菌素测定的液相色谱-串联质谱法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料中盐酸沃尼妙林和泰妙菌素的 测定。 本标准盐酸沃尼妙林和泰妙菌素的检出限均为0.1mg/kg, 定量限均为0.5 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 原理 试样用甲醇提取，经混合型阳离子固相小柱净化，甲酸乙腈水溶液溶解、过膜后，供液相色谱-串联质 谱仪测定，外标法定量。 4 试剂或材料 除特殊说明外，本法所用试剂均为分析纯。 4.1 水：GB/T 6682,一级。 4.2 甲醇。 4.3 甲醇：色谱纯。 4.4 乙腈：色谱纯。 4.5 甲酸：色谱纯。 4.6 2%甲酸溶液：取甲酸2 mL, 加水定容至100 mL。 4.7 0.1%甲酸溶液：取1mL 甲酸，加水定容至1000mL。 4.8 5%甲酸溶液：取甲酸5 mL, 加水定容至100 mL。 4.9 5%氨水-甲醇溶液：取5mL 氨水与95 mL 甲醇混合。 4.100.1%甲酸-乙腈水溶液：取1mL 甲酸，加入200mL 乙腈，用水定容至1000mL。 4.11 盐酸沃尼妙林(CAS号：133868-46-9):纯度大于等于99% 4.12泰妙菌素(CAS 号：55297-95-5):纯度大于等于98%。 4.13标准储备溶液(1000μg/mL): 依次称取盐酸沃尼妙林(4.11)和泰妙菌素(4.12)各0.05 g(精确到 0.0001g), 分别用乙腈(4.4)溶解并定容至50 mL 棕色容量瓶中，混匀。 -20℃以下保存，有效期为3 个月。 4.14 混合标准溶液(250μg/mL): 准确移取1000μg/mL 盐酸沃尼妙林和泰妙菌素标准储备溶液各25 mL 于100mL 棕色容量瓶中，用乙腈稀释并定容至刻度，混匀。此溶液临用现配。 4.15 标准系列工作溶液：准确移取适量的混合标准溶液(4.14),用0.1%甲酸-乙腈水溶液(4.10)配制 成浓度分别为2.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、100μg/L、200 μg/L、500μg/L的标准工作溶液。此溶液 临用现配。 2 农业农村部公告第197号—2—2019 4.16 混合型阳离子交换固相萃取柱(MCX):150 mg/6 mL或相当者。 4.17 微孔滤膜：0.22 μm, 水系。 5 仪器设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源(ESI)。 5.2 分析天平：感量0.1 mg。 5.3 离心机：转速不低于5000 r/min。 5.4 氮吹仪。 6 样品 按GB/T 20195的规定制备样品，至少约200g,粉碎过0.42 mm 孔径的分析筛，充分混匀，装入磨口 瓶中备用。 7 试验步骤 7.1 提取 平行做2份试验。配合饲料、浓缩饲料、精料补充料称取5 g 试样，添加剂预混合饲料称取2 g 试样， 精确至0.0001g,置于50mL 离心管中，加入20 mL 甲醇(4.2),超声提取30 min,于5000 r/min离心 10 min。 收集上清液于100mL 棕色容量瓶中，并向残渣中加