YC_T 408-2011 烟用添加剂中正二氢愈疮酸的测定 高效液相色谱法.docx

ICS 65.160 X 85 备案号：33253—2011 中 华 人 民 共 和 国 烟 草 行 业 标 准 YC/T 408—2011 烟用添加剂中正二氢愈疮酸的测定 高效液相色谱法 Determination of nordihydroguaiaretic acid in tobacco additives— High performance liquid chromatographic method 2011-08-02发布 2011-09-01 实施 国家烟草专卖局 发 布 I YC/T 408—2011 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家烟草专卖局提出。 本标准由全国烟草标准化技术委员会烟用材料分技术委员会(SAC/TC 144/SC8)归口。 本标准起草单位：云南烟草科学研究院、红塔烟草(集团)有限责任公司、红云红河烟草(集团)有限 责任公司。 本标准主要起草人：陈永宽、张承明、缪明明、者为、王璐、孟昭宇、刘巍、段焰青、杨光宇、朱丽、 谭建林。 1 YC/T 408—2011 烟用添加剂中正二氢愈疮酸的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了烟用添加剂(香精和料液)中正二氢愈疮酸的测定方法——高效液相色谱法。 本标准适用于烟用添加剂(香精和料液)中正二氢愈疮酸的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 YC/T 145.10—2003 烟用香精抽样 3 原理 采用含0.1%甲酸的甲醇-水混合溶剂萃取烟用添加剂中的正二氢愈疮酸，经高效液相色谱仪分 离，以荧光检测器测定，外标法定量。 4 试剂与材料 除特殊要求外，均使用分析纯试剂。 4.1 水，符合 GB/T 6682 中一级水的要求。 4.2 乙腈，CH?CN, 色谱纯。 4.3 甲醇，CH?OH。 4.4 甲酸，HCOOH。 4.5 正二氢愈疮酸，Ci?H??O? (CAS:500-38-9), 纯度≥97%。 4.6 抗坏血酸，C?H?O? (CAS:50-81-7)。 4.7 甲醇-水混合溶剂，体积比9:1。 4.8 萃取溶剂：称1.0 g 抗坏血酸(4.6)用甲醇-水混合试剂(4.7)溶解转移至1000 mL 容量瓶中，定 容至刻度。 4.9 标准溶液 4.9.1 一级标准储备液 称取50 mg (精确至0. 1 mg) 正二氢愈疮酸(4.5),用萃取溶剂(4.8)溶解转移至100 mL 容量瓶中， 定容至刻度。 一级标准储备液在-20℃下避光保存，有效期1个月。 2 YC/T 408—2011 4.9.2 二级标准储备液 移取5 mL 一级标准储备溶液(4.9.1)至50 mL 容量瓶中，用萃取溶剂(4.8)定容至刻度。二级标 准储备液在一20℃条件下避光保存，有效期1个月。 4.9.3 标准工作溶液 分别准确移取100μL、300μL、500 μL、1000μL、2000 μL、4000μL二级标准储备液(4.9.2)至 50mL 容量瓶中，用萃取溶剂(4.8)定容到刻度，得到系列标准工作溶液。即配即用。 5 仪器设备 常用实验仪器及下述各项： 5.1 高效液相色谱仪，配置柱温箱、梯度洗脱功能和荧光检测器。 5.2 分析天平，感量0.1 mg。 5.3 振荡器，最大转速应不小于200 r/min。 5.4 离心机，最大转速应不小于8000 r/min。 5.5 有机相滤膜，0.45 μm。 6 抽样 按照 YC/T 145.10—2003抽取样品。 7 分析步骤 7.1 样品处理 称取2 g(精确到0.1 mg) 试样于100 mL 具塞锥形瓶中，准确加入50 mL 萃取溶剂(4.8),用 150 r/min振荡萃取10 min,取 3 mL 萃取液置于10 mL 具塞离心试管中，在5000 r/min 转速条件下离 心10 min,取 1 mL 上清液过有机相滤膜(5.5),滤液用高效液相色谱仪分析。 若待测试样溶液的浓度超出标准工作曲线浓度范围，则对样品前处理适当调整后重新测定。 7.2 高效液相色谱条件 高效液相色谱条件：以下分析条件可供参考，采用其他条件应验证其适用性。 ——Ci?色谱柱，规格：填料粒径3.0μm,150 mm(长度)×4.6 mm (内径); ——流动相 A:0.1% 的甲酸乙腈溶液(体积分数); ——流动相B:0.1