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手性选择法分离苯磺酸氨氯地平 苯磺酸铵（化学结构公式见图1）是第三代二羟吡啶钙抗剂。本品对血管选择性较强, 可舒张冠状血管和全身血管, 增加冠脉血流量, 降低血压, 已成为治疗高血压病的一线药物 已有文献报道用毛细管电泳法、HPLC手性固定相法拆分苯磺酸氨氯地平对映体 环糊精及其衍生物由于其主客体包埋作用的立体选择性、稳定性和耐光性等特点, 成为色谱分离中广泛采用的一类重要的手性选择剂 1 色谱检测设备 LC-10A 高效液相色谱仪、SPD-10A 紫外可见光检测器 (日本岛津公司) , N2000色谱工作站 (浙江大学) 。 苯磺酸氨氯地平对照品、苯磺酸左旋氨氯地平对照品 (中国药品生物制品检定所) , 羟丙基- 2 2.1 色谱柱:Hypersil BDS C 2.2 苯磺酸左旋氨氯地平对照品溶液的制备 苯磺酸氨氯地平 (消旋) 溶液:精密称取苯磺酸氨氯地平对照品适量, 用甲醇溶解后, 用水-甲醇 (体积比55∶45) 稀释制成质量浓度为5.0 mg·L 苯磺酸左旋氨氯地平溶液:精密称取苯磺酸左旋氨氯地平对照品适量, 用甲醇溶解后, 用水-甲醇 (体积比55∶45) 稀释制成质量浓度为2.5 mg·L 3 3.1 cd和hp- -CD和HP- 3.2 sde- 在本文的研究中, 作者考察了不同浓度的SBE- 3.3 流动相的ph值 考察不同的流动相 (水相) pH值对苯磺酸氨氯地平对映体分离的影响, 由于苯磺酸氨氯地平的pKb值为5.5, 故确定考察流动相的pH值范围为2.5~5.0。由表2可见, 随着pH值的增加, 保留时间增加, 分离度 3.4 有机改性剂的选择 分别用甲醇和乙腈作为有机改性剂考察其对对映体分离的影响。结果表明, 当以甲醇为有机改性剂时, 对映体能达到基线分离, 而以乙腈为改性剂时, 对映体仅能达到部分分离, 因此作者选择甲醇作为有机改性剂。 由表3可见, 当甲醇体积分数为35%时, 在60 min内未观察到氨氯地平色谱峰。当甲醇体积分数在40%~50%内变化时, 随着甲醇比例的增加, 分离度变小, 容量因子 3.5 不加缓冲盐对过缓冲系统的影响 考察流动相中添加缓冲盐 (三乙胺-冰醋酸、乙酸铵、磷酸二氢钠) 和不加缓冲盐对对映体分 — —Peaks of amlodipine enantiomers were not seen in 60 min. 离的影响。结果发现, 缓冲盐加入对对映体分离的影响差别不大。 3.6 柱温不同的条件下,游线稳定性不高,柱温回收率低 随着柱温的升高, 苯磺酸氨氯地平对映体的分离度逐渐减小 (图2) 。可能是在柱温较高的条件下, 对映体与环糊精包合物的稳定性较低, 从而降低了手性识别作用。因此, 选择20 ℃ (室温) 作为实验温度。 3.7 样品流速相关原因 实验考察了流速对苯磺酸氨氯地平对映体分离的影响。流速高可以缩短分析时间, 但样品过 快出柱不利于其与环糊精之间的相互作用;流速减慢分离度会随之增加, 但同时也会造成峰展宽、保留时间增加等不利因素。综合考虑, 选择流速为0.8 mL·min 3.8 苯磺酸左旋氨氯地平的色谱特征 在优化的色谱条件下, 取苯磺酸氨氯地平 (消旋) 溶液以及苯磺酸左旋氨氯地平溶液各20 μL, 分别注入液相色谱仪, 得到消旋体和左旋体的色谱图 (图3) 。由图3可见, 苯磺酸氨氯地平的左旋体先于右旋体出峰。 4 sbe---s 作者采用SBE-