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高效液相色谱法测定苯磺酸氨氯地平片的含量 苯磺酸氨基丙烯酸酯是由美国惠瑞（pfitz）开发的抗高血压药物二羟吡啶，用于治疗高血压（单一或其他药物）和心绞痛。 1 p型紫外分离器 日本岛津LC-10Atvp型高效液相色谱仪, SPD-10Atvp型紫外检测器。苯磺酸氨氯地平对照品及苯磺酸氨氯地平片 (规格:5mg) 均由本所提供 (批号 。甲醇为色谱纯, 其它试剂为分析纯。 2 实验方法 2.1 在铬条件下和系统适用性试验 色谱柱:PhenomenexODS C 18 (5μm、4.6mm×150mm) ;流动相:甲醇-0.03mol·L 2.2 对照品溶液的制备 精密称取苯磺酸氨氯地平对照品约17mg, 置100ml量瓶中, 加入流动相稀释至刻度, 摇匀, 再精密量取5ml置25ml量瓶中, 加流动相稀释至刻度, 摇匀, 滤过, 作为对照品溶液。 2.3 供试品溶液的制备 取本品20片, 精密称定, 研细, 精密称取细粉适量 (约相当于氨氯地平5mg) , 置200ml量瓶中, 加入流动相稀释至刻度, 摇匀, 滤过, 作为供试品溶液。 3 结果 3.1 对照溶液的制备 精密称取本品20片, 研细, 精密称取适量 (约含氨氯地平10mg) 置50ml量瓶中, 加入流动相稀释至刻度, 摇匀, 滤过, 作为供试品溶液 (每1ml中约含200μg) 。精密量取1ml置100ml量瓶中, 用流动相稀释至刻度, 摇匀, 制成每1ml中约含氨氯地平2μg的溶液作为对照溶液。调节检测灵敏度, 使氨氯地平峰高为满量程刻度的10%~15%;再精密量取供试品溶液和对照溶液各10μl, 分别注入液相色谱仪, 记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍, 按面积归一化法计算有关物质的量, 结果见表1。 3.2 对照品储备液的制备 精密称取苯磺酸氨氯地平对照品34.50mg, 置100ml量瓶中, 加入适量流动相, 超声溶解, 并用流动相稀释至刻度, 摇匀, 配成对照品储备液 (含氨氯地平248.8mg·L 3.3 注射精密度测试 精密量取“2.2”项下的对照品溶液10μl, 连续进样6次。计算求得RSD为0.23%。结果表明, 精密度良好。 3.4 磺酸氨氯地平片磺酸氨氯地平片的制备 取苯磺酸氨氯地平片含量测定溶液于0、0.5、1、2、3、4h进行试验, 记录峰面积, 结果磺酸氨氯地平片含量的RSD为0.16%。结果表明在含量测定条件下, 样品溶液在4h内稳定性良好。 3.5 流动相的配制 精密称取苯磺酸氨氯地平对照品 (约为14、17和20mg) ) , 置100ml量瓶中, 按处方比例加入空白辅料, 混合均匀后, 加入流动相, 按“2.2”项方法配制高、中、低三种不同浓度的溶液。分别精密量取10μl, 注入高效液相色谱仪, 记录色谱面积, 结果见表2, 平均回收率为0.12%。 3.6 重量测定 精密量取“2.2”项下的对照品溶液和“2.3”项下的供试品溶液, 注入液相色谱仪, 按外标法以峰面积计算, 结果见表3。 4 讨论 4.1 干扰物质测定 经过专属性研究色谱图可知, 空白辅料及空白辅料可能产生的杂质对样品有关物质测定无干扰;苯磺酸色谱峰与溶剂峰一致, 对样品有关物质测定无干扰;样品高温、光照、强碱、强酸、强氧化破坏样品色谱图与破坏前相比, 都产生了许多新杂质且原有杂质明显增大, 尤以光照和强碱破坏所产生的新杂质最多, 但主峰与杂质峰都能完全分离。 4.2 紫外扫描g 精密称取苯磺酸氨氯地平对照品约17mg, 制成每1ml中含氨氯地平约12μg的溶液, 在190~400nm波长范围内进行紫外扫描, 苯磺酸氨氯地平在239nm波长处有最大吸收, 且空白辅料的流动相溶液在239nm处基本无吸收, 不干扰样品测定, 专属性较好。为了检出杂质, 波长选定为239nm。