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PEG模拟干旱胁迫对大叶醉鱼草种子萌发及幼苗生理特性的影响
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李新蕾 李叶芳 关文灵
Key:大叶醉鱼草;干旱胁迫;种子萌发;幼苗生长;抗逆生理指标;抗旱性
世界上有1/3以上的土地处于干旱和半干旱地区[1]。我国现有干旱区面积占国土总面积的383%[2-3]。干旱是影响植物分布和生长发育的主要环境因子之一,其危害程度在诸多非生物胁迫中占首位[4]。研究植物干旱胁迫响应机制、评价其抗旱性,将为提高植物水分利用效率、提高植物抗旱性能、选育抗旱优良品种、发展高产耐旱农业提供理论指导,同时选择适生植被对受损生态系统进行植被修复、恢复和人工生态系统的建立是非常有效的环境治理途径[5]。
在干旱环境下,种子萌发和幼苗生长阶段是决定植物能否正常生长的关键时期,而耐旱性较好的植物,其种子在缺水环境下常常会形成特殊的萌发机制以确保萌发与繁衍。同时干旱胁迫可引起植物幼苗失水,诱发渗透胁迫及活性氧损伤。为了保持体内的水分平衡,使细胞发挥正常功能,抵御干旱胁迫伤害,植物的细胞液渗透势会降低,气孔关闭推迟,同时酶促系统中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)等的合成活动增强[6-8]。聚乙二醇(PEG)作为一种渗透调节剂,能较为理想地模拟干旱环境,具有简便快速、重复性好、周期短等优点,已被广泛应用于种子和幼苗干旱胁迫等相关试验中,并在园林植物罗布麻[9]、小雀花[10]、玉带草[11]等种子种苗的抗旱特性方面取得了较好的研究成果。
大叶醉鱼草是醉鱼草属(Buddleja L.)植物中具有很高观赏价值的种类,既可作为庭园观赏植物,也是很好的生态修复植物。目前,在欧洲引种栽培的醉鱼草属品种已超过120个,是欧美园林植物中最流行的观赏灌木之一。我国虽有丰富的醉鱼草属种质资源,但还没有进行系统的发掘利用[12]。目前,国内外对大叶醉鱼草的研究主要集中在其药用成分及杀虫成分上,关于其抗性的研究较少,且主要研究其对重金属的耐性。本试验以大叶醉鱼草为材料,通过PEG-6000人工模拟不同程度的干旱胁迫,研究干旱胁迫对大叶醉鱼草种子萌发、渗透调节物质、抗氧化酶系统等生理生化特性的影响,以期明确大叶醉鱼草种子及幼苗对干旱环境的适应机制,为大叶醉鱼草在园林及在生态修复中的应用提供相关理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验用大叶醉鱼草种子于2018年5—6月采自云南省昆明市,采集后保存于4 ℃冰箱中。2018年5—8月在云南农业大学园林园艺学院实验室进行PEG-6000模拟干旱胁迫下种子萌发试验。2018年6月在云南农业大学温室进行播种育苗,2018年9月移至云南农业大学园林园艺学院实验室,进行PEG-6000模拟干旱胁迫下幼苗生长试验。
1.2 试验设计
1.2.1 种子萌发试验 选取大小均匀的优质大叶醉鱼草种子,先用1%体积分数的次氯酸钠浸泡消毒30 min,再用蒸馏水冲洗直至无次氯酸钠后待用。以培养皿(直径 9 cm,内铺有滤纸)作为发芽床,将供试种子均匀排布在加有等量、质量分数(下同)分别为0(蒸馏水,CK)、5%、10%、15%、20%、25%的PEG-6000水溶液的发芽床中,每床50粒,置于光照培养箱中进行萌发测定,培养温度为25 ℃、光照时间为12 h/d。每天向滤纸上加蒸馏水或PEG-6000水溶液以保持原始质量,每处理重复3次。每天18:00观察并记录大叶醉鱼草种子萌发情况,种子发芽的标准为种子露出胚根,连续3d种子发芽数不足供试种子数的1/100视为萌发结束,于 16 d 后结束试验。记录发芽启动时间、发芽持续时间,统计发芽势,最后计算发芽率、发芽指数。计算方法或公式如下:
发芽启动时间:从发芽试验开始到第1粒种子开始萌发所需时间(d);
发芽持续时间:第1粒种子开始萌发到萌发结束所需时间(d);
发芽率(GR)=种子发芽数/供试种子总数×100%;
发芽势=规定时间内发芽种子总数/供试种子总数×100%;
发芽指数(GI)=∑(在不同时间的发芽数/对应的发芽所用时间)。
1.2.2 幼苗模拟干旱胁迫试验 将营养土和珍珠砂按体积比3 ∶ 1配成基质,等量分装于塑料盆(16 cm×18 cm)中,每盆种4株幼苗,添加适量的蒸馏水后放入人工气候箱中进行培养。光照条件为白天12 h(25 ℃),夜晚12 h(15 ℃),进行模拟干旱胁迫处理。根据种子萌发试验的结果,设置 PEG-6000 水溶液质量分数分别为10%、20%、30%及对照(蒸馏水,CK),每个处理设3次重复,每个重复2盆。每天18:00用称质量法补充PEG-6000水溶液至原始质量,分别于干旱胁迫处理后3、6、9 d,取幼苗叶片放入液氮速冻后转移至-80 ℃冰箱保存,用于测定幼苗叶片的各项生理指标。
1.3 测
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