注射用炎琥宁的药理作用及临床应用.docxVIP

注射用炎琥宁的药理作用及临床应用 督察岩琥珀酸盐的主要成分是贯透莲酯（14-脱氧-11、12-二脱氢溶合物-3、19-二羟基二氟丁基盐）。这是一种临床常用的抗高血压药物。适用于病毒性肺炎和病毒性上呼吸道感染。 1 实验材料 1.1 仪器、设备和制造 气浴恒温振荡器（金坛市精达仪器制造有限公司），紫外分光光度计（北京瑞利分析仪器有限公司），电热恒温培养箱（上海一恒科学仪器有限公司），生物安全柜（济南鑫贝西生物技术有限公司），正置显微镜（日本尼康光学显微镜制造有限公司），二氧化碳培养箱（松下健康医疗器械株式会社），超净工作台（天津市泰斯特仪器有限公司），倒置显微镜（上海光学仪器一厂），离心机（北京时代北利L离心机有限公司）。 1.2 试验对象、阳性药物和试剂 1.2.1 测试对象 注射用炎琥宁，由陕西博森生物制药股份集团有限公司提供。 1.2.2 供试药物及试剂 2-氨基蒽（Alfa Aesar），迭氮钠（天津市风船化学试剂科技有限公司），敌克松（AccuStandard），2-氨基芴（北京索莱宝科技有限公司），4-硝基喹啉-N-氧化物（北京百灵威科技有限公司），9-氨基吖啶（Sigma-Aldrich），环磷酰胺（Alfa Aesar），丝裂霉素C（3A Chemicals）。 1.2.3 glucose6-phosph东南角 大鼠肝S9库(Chi Scientific, Inc)，D-Glucose 6-phosphate disodium salt hydrate（北京索莱宝科技有限公司），NADP Na2（北京索莱宝科技有限公司），L-组氨酸（Sigma-Aldrich）， 1.3 实验系统 1.3.1 蘑菇 TA98、TA100、TA102、TA1535、TA1537购自美国Molecular Toxicology, Inc.。 1.3.2 细胞植物 中国仓鼠肺成纤维细胞（CHL）购自美国模式培养物集存库（ATCC）。 1.3.3 环境动物试验 SPF级昆明小鼠50只，雌性各半，购自辽宁长生生物技术股份有限公司，试验在屏障环境动物实验设施内进行，环境温度20～26℃，湿度40%～70%。 2 实验方法 2.1 回复突变菌落数测定 采用《药物遗传毒性研究技术指导原则》中推荐的5种菌株：TA98、TA100、TA102、TA1535和TA1537进行试验，在代谢和非代谢活化条件下采用平皿掺入法进行试验，每种菌株设5个剂量，分别为5 000、1 581、500、158、50 μg/皿，同时设空白对照、溶媒对照（纯水）、阳性对照，每组3个平皿，在37℃培养48～72 h，计数每皿的回复突变菌落数，计算每组回复突变菌落数平均值±标准差 结果判断：①至少有1个测试菌株中最少出现2个剂量的回复突变菌落数明显增加，且菌株TA98、TA100、TA102的回复突变菌落数≥溶媒对照的2倍，菌株TA1535和TA1537的回复突变菌落数≥溶媒对照的3倍，结果为阳性；②受试物的各剂量没有剂量反应关系，也没有回复突变数的明显增加,结果为阴性。 2.2 丝裂霉素对照 采用《药物遗传毒性研究技术指导原则》中推荐的CHL细胞进行试验，在代谢和非代谢活化条件下进行试验，剂量设计为0.5、0.25、0.125 mg/mL、溶媒对照（纯水）、阳性对照（丝裂霉素C和环磷酰胺）。在非代谢活化条件下6 和24 h给药处理、代谢活化6 h给药处理，每组2个平行，给药后在24 h内收集细胞并制作标本，每组观察300个中期相细胞染色体，计数染色体畸变数 数据分析方法：使用卡方分析方法进行数据分析。 结果判断：①至少有1个剂量组的畸变数与溶媒对照组比较具有显著增加，并且该增加具有剂量-反应趋势或剂量依赖性，结果为阳性；②各剂量组的畸变数与溶媒对照组比较无显著增加，也不具有剂量-反应趋势或剂量依赖性，结果为阴性。 2.3 小鼠骨髓骨髓中嗜多染红细胞检测 选用昆明小鼠进行试验，每组10只，雌雄各半，共50只。剂量设为400、200、100 mg/kg、溶媒对照（5%葡萄糖溶液）和阳性对照（环磷酰胺）。剂量组和溶媒对照尾静脉注射给药，给药体积25 mL/kg；阳性对照经口灌胃给药，剂量40 mg/kg，给药体积20 mL/kg。试验共给药2 d，每日1次，2次给药时间间隔24 h，在末次给药后的18～24 h取股骨骨髓液，涂片、染色、阅片。每只动物观察至少500个总红细胞（RBC），计算嗜多染红细胞在总红细胞[嗜多染红细胞（PCE）＋正染红细胞（NCE）]中的比例；每只动物观察4 000个嗜多染红细胞同时计数有微核的嗜多染红细胞数 数据分析方法：使用卡方分析方法进行数据分析。 结果判断：①至少有1个剂量组的微核与溶媒对照组比较具有显著增加，并且