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甘草化学成分研究 甘草是“木兰”科的一种含有甘草的环草植物。植物的干燥根和根茎被记录在《神农本草经》中。这是一种中国传统的中药，具有“十分之九草”的美誉，在许多临床处方中得到广泛应用。2010年版的《甘草》是甘草科的一种常见的疾病。它是由甘草、肿胀甘草、高羊茅和甘草、高羊茅的干燥根和根茎组成的。其中甘草分布最广, 主要分布于中国的华北、东北和西北地区, 胀果甘草分布于新疆及甘肃西北部, 而光果甘草仅产于我国新疆地区。现有研究表明, 甘草主要化学成分为三萜和黄酮类, 此外, 还含有生物碱、香豆素等。为了更深入地研究甘草的物质基础, 本实验对甘草的化学成分进行了研究, 从甘草95%乙醇提取物正丁醇萃取部分分离得到14个化合物, 包括7个三萜皂苷和7个黄酮类成分, 分别鉴定为macedonoside E (1) 、22β-乙酰基乌拉尔甘草皂苷C (22β-acetyl-uralsaponin C, 2) 、甘草酸 (glycyrrhizic acid, 3) 、乌拉尔甘草皂苷F (uralsaponin F, 4) 、甘草皂苷G 1仪器与材料 200 L提取罐 (浙江苍南县立瓯石化设备有限公司) , 减压蒸馏器 (浙江苍南县立瓯石化设备有限公司) ;Bruker AV-500型核磁共振仪 (Bruker Bio Spin公司) ;Buchi688型中压液相色谱系统 (BüCHI, 瑞士) ;Agilent 1100型制备液相色谱仪 (Agilent, 美国) , 制备用HPLC色谱柱为Zorbax SB-C 甘草饮片购自于浙江中医药大学中药饮片厂, 产自甘肃陇西, 经浙江大学药学院陈柳蓉副教授鉴定为豆科甘草属植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的根和根茎, 原生药样本 (GC-120509) 存放于浙江大学药物信息学研究所。 2提取与分离 甘草饮片20 kg, 用8倍量的95%乙醇回流提取3次, 每次2 h, 将所得提取物回收至无醇味后, 得约4 L浓缩液, 依次用等体积的石油醚、醋酸乙酯、正丁醇各萃取3次, 得到石油醚萃取物19 g, 醋酸乙酯萃取物347 g, 正丁醇萃取物409 g。将正丁醇部分进行硅胶柱色谱, 用二氯甲烷-甲醇不同比例 (100∶1→0∶1) 进行梯度洗脱, 经薄层色谱分析后, 合并相同流分, 得到4个部分。二氯甲烷-甲醇 (1∶1) 洗脱部分再经ODS柱色谱, 分别用10%和20%乙腈水洗脱, 得到化合物1 (4.1 mg) 和2 (5.5 mg) ;其余各部分经多次中压硅胶柱色谱、ODS柱色谱以及高效液相制备色谱等手段进一步分离纯化, 得到化合物3 (11.3 mg) 、4 (5.1 mg) 、5 (31.3 mg) 、6 (12.9 mg) 、7 (190.0 mg) 、8 (104.0mg) 、9 (11.0 mg) 、10 (179.0 mg) 、11 (15.9 mg) 、12 (136.1 mg) 、13 (3.6 mg) 、14 (14.3 mg) 。 3结构鉴定 化合物1:白色固体。UVλ 化合物2:白色固体。UVλ 化合物3:白色胶状固体。ESI-MS m/z:821[M-H] 化合物4:白色固体。ESI-MS m/z:895[M-H] 化合物5:白色固体。ESI-MS m/z:837[M-H] 化合物6:白色固体。ESI-MS m/z:863[M-H] 化合物7:白色固体。ESI-MS m/z:835[M-H] 化合物8:白色针状结晶 (甲醇) 。ESI-MS m/z:255[M-H] 化合物9:黄色固体粉末。ESI-MS m/z:271[M-H] 化合物10:黄色针状结晶 (甲醇) 。ESI-MS m/z:255[M-H] 化合物11:淡黄色晶体 (甲醇) 。ESI-MS m/z:475[M+HCOO] 化合物12:白色固体。ESI-MS m/z:417[M-H] 化合物13:黄色粉末。ESI-MS m/z:577[M-H] 化合物14:黄色粉末。ESI-MS m/z:549[M-H]