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沼液培养小球藻对co 人类工业生产产生了大量的co2。气氛中co的浓度从28010-6号变为38010-6。这也是世界转型的主要原因。因此，控制co排放已成为各国政府、学术界和学术界的热点之一。微藻具有生长速度快、适应性强、光合速度快等优点。在光合作用过程中，可以固定大量的co。其捕获效率是植物的10.50倍。解决co排放的全球问题具有重要的应用价值。国内外有很多关于微藻固定co和污水处理的报告，但很少有研究利用微藻来固定co和污水处理。利用废水培养微藻，不仅可以节省微藻的固定成本，还可以有效清除水中的各种污染，尤其是氮、磷等营养成分[4.7]。 沼气厌氧发酵生产的粗沼气除甲烷外主要含有20%~40%的CO2,发酵过程中产生了大量的发酵残留物沼液和沼渣,其中沼液中含有丰富的氮、磷等元素,直接排放会引起水体的富营养化.如果把沼气发酵和微藻培养结合起来,即利用沼气中的CO2作为微藻培养的碳源,沼液作为培养微藻的营养来源,不仅能利用微藻净化沼气固定CO2,还可对沼液进行脱氮除磷,有效降低微藻的培养成本,达到显著的环境效益和双重的经济效益.本文利用沼气发酵产生的废液作为小球藻的培养基,以CO2和空气的混合气体模拟粗沼气,考察了不同的通气条件对小球藻生长以及CO2去除效率及去除量的影响,最后考察了小球藻对粗沼气中的CO2的去除,以期为小球藻法去除粗沼气中或其他废气中的CO2提供研究基础. 1 材料和方法 1.1 藻种的保存方式 实验藻种为普通小球藻(Chlorella vulgaris),由暨南大学张成武教授提供.保种用的培养基均采用BG11培养基:NaNO31.5 g L-1,K2HPO4·3H2O 0.04 g L-1,MgSO4·7H2O 0.075g L-1,CaCl2·2H2O 0.036 g L-1,Na2CO30.02 g L-1,柠檬酸0.006g L-1,柠檬酸铁0.006 g L-1,2Na·EDTA 0.001 g L-1,微量元素H3BO30.061 mg L-1,MnSO4·H2O 0.169 mg L-1,ZnSO4·7H2O0.287 mg L-1,CuSO4·5H2O 0.0025 mg L-1,钼酸铵0.0125 mg L-1.藻种保存方式有室温弱光静置保种(每天摇2~3次)和平板4℃冰箱放置保种,平板培养基在液体培养基中加入2%的琼脂. 1.2 沼液的基本营养成分测定 培养基采用南京工业大学国家生化工程技术研究中心沼气示范工程沼气发酵后的废液为基础培养基.沼液经过沉降池,去除较大的固体颗粒,再经过板框压滤机过滤后,去除较小的颗粒,储存在废液池中备用.分别采用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法、钼酸铵分光光度法、等离子发射光谱法测定总氮、总磷、金属离子浓度[9~10],沼液中各成分含量如表1所示,其初始pH值在8.5左右.可以看出,沼液含有微藻生长所需的基本营养成分,可以考虑作为微藻的基础培养基. 1.3 空气源采用空气和钢瓶混合系统 如图1所示,微藻是在自行设计的简易光生物反应器中进行培养的,光生物反应器为内管径3 cm,管长度55 cm,厚度0.3 cm,工作装液量300 m L的长玻璃管,经高压蒸汽灭菌后使用.来自空气泵的空气和钢瓶中的CO2在缓冲瓶混合均匀后,通过硅胶管连接到光生物反应器供气.分别通过调节控制CO2、空气流速的两个转子流量计,从而在气流中达到所需的CO2浓度. 1.4 小球藻的生长 采用日光灯作为光源,光照强度5 500 lx,光暗比18:6,培养温度为25~28℃.将小球藻接种到煮沸冷却后的沼液培养基中,起始接种藻液的A680 nm在1.0左右,通气量为200 mL min-1培养14 d,每天对其生物量进行测量. 1.5 沼液光吸收值的测定 光吸收值法:取1 mL小球藻藻液,用蒸馏水适当稀释后,以蒸馏水为空白对照,测定其在680 nm下的光吸收值.取平均值乘上稀释倍数再减去沼液的光吸收值进行修正,以此衡量小球藻的生物量. 干重法:取适量小球藻藻液,8 000 r min-1离心,烘干后称重.干重与光吸收值的线性关系为:Dry weight(g L-1)=0.2398A680 nm-0.0858,R2=0.9987. 1.6 气体污染物去除率和去除co 向藻液中通入CO2和空气混合气体,用4 L气体取样袋分别收集通入藻液的混合气体和经藻液利用后的气体,通过CO2红外气体分析仪测量取样袋中气体的CO2浓度,重复测定3次.根据通气流量和通入气体与流出气体的CO2浓度变化算得小球藻对CO2的去除率和去除量. 2 结果与讨论 2.1 沼液培养:小球藻的培养基 沼液中虽然含有适合小球藻生长的基本营养成分,但其浊度、pH值较高,对小球藻的生长有不利影响.小球藻直接接种于沼液后出现不适应,藻细