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简易穴位埋线治疗哮喘的最佳穴位组方 气管哮喘是一种由各种细胞和细胞组成的慢性呼吸道炎症疾病。这是临床上常见的和罕见的疾病。该病难以根治且易反复发作。在世界范围内其发病率及死亡率均呈增加趋势,粗略估计我国有1600～2000万哮喘患者。近年来中医药对本病的治疗研究取得了较大进展,其中穴位埋线法治疗支气管哮喘的研究收到了良好效果,其实验研究方面也有较大进展。前期研究证实简易穴位埋线可抑制哮喘气道炎性反应,减少肺组织中炎性细胞的募集、浸润,而对哮喘获得治疗效果。本研究通过观察不同穴位简易穴位埋线对哮喘模型大鼠气道炎性反应的影响,观察从标、或从本、或标本兼治不同角度选取穴位治疗支气管哮喘的疗效对比,为进一步研究和临床选穴提供理论依据。 1 材料和方法 1.1 动物、药品和试剂 动物:选用清洁级健康Wistar雄性大鼠48只,质量(300±50)g,贵阳医学院实验动物研究中心提供(合格证号:0003474)。动物置于清洁柜中,实验室温度保持在(20±1)℃,湿度(45±5)%左右。喂以大鼠普通饲料,自由饮水。 主要药品、试剂:卵蛋白(Ovalbumin,OVA)(GradeⅡ,美国Sigma公司);地塞米松磷酸钠注射液(批号0509302,贵州光正制药有限责任公司)。 1.2 方法 1.2.1 实验大鼠老年酸,2周f 将48只大鼠随机分为肺俞膻中肾俞组(A) 、肾俞组(B)、肺俞膻中组(C)、地塞米松组(D)、模型组(E)、对照组(F),每组8只。 参照文献复制哮喘模型:除对照组外其余各组大鼠于实验第1天和第8天分别腹腔注射10%OVA和氢氧化铝溶液1 mL致敏,于实验第15天起开始雾化吸入1%OVA溶液20 min诱喘,雾化流量3 mL/min,每天1次,连续2周。对照组用注射用水代替OVA液进行注射和雾化吸入。 1.2.2 地塞米松模型组d组 3个埋线组:依据文献,肺俞膻中组(C组)取“肺俞”“膻中”;肾俞组(B组)取“肾俞”;肺俞膻中肾俞组(A组)取“肺俞”“膻中”“肾俞”。3个埋线组具体操作:从实验第1天开始埋线,直到实验结束,共埋1次。先将羊肠线置于消毒弯盘中,倒入0.9%NaCl溶液冲洗,并剪成0.3～0.5 cm小段若干。将无菌9号注射针若干事先准备好,然后将肠线从注射针针尖穿入,再将预先剪去针尖的毫针从注射针针尾部穿入,组成一套埋线针。埋线时一穴一针,需两人配合,一人左手捉拿大鼠,右手牵拉大鼠后肢,另一人穿刺埋线,先用乙醚雾化吸入麻醉大鼠(实验用麻醉是为了防止大鼠过度挣扎),碘伏、乙醇消毒3组大鼠埋线穴区皮肤,持针分别从大鼠“肺俞”“膻中”“肾俞”刺入,“肺俞”“肾俞”直刺6 mm,“膻中”平刺6 mm。右手拇指抵住毫针针尾作注射状,缓慢将肠线推入穴内,觉注射针内有空虚感时方可出针,并确认肠线已埋入鼠体内,埋线完后,大鼠穴区无需任何处理。 地塞米松组(D组):于实验第15天起腹腔注射地塞米松1.5 mg/kg。每天1次,连续2周。 模型组(E组):于实验第15天起腹腔注射灭菌注射用水20 mg/kg。每天1次,连续2周。 对照组(F组):正常饲养,不做任何干预处理。 1.2.3 内生动物内生大鼠股动脉放血 治疗2周(埋线1月),于末次激发后2～4 h内处死大鼠(股动脉放血)。开胸,结扎右肺,常规留取右肺中下叶组织,4%多聚甲醛固定24 h,常规石蜡包埋和切片(厚4 μm),HE染色。 1.2.4 大鼠激发后行为变化 (1)观察各组大鼠激发后哮喘症状发作程度(包括各组大鼠激发后行为变化、打喷嚏次数、鼻痒抓鼻次数),将每组大鼠放入自制雾化吸入箱内:①肉眼观察大鼠激发后的行为变化,包括大鼠是否抓鼻、喷嚏、呼吸状态、运动情况等。②计数大鼠激发后1 h内打喷嚏、鼻痒抓鼻的次数(打喷嚏、鼻痒抓鼻次数动作判断标准参照文献)(1 h内1人计数一组大鼠激发后的打喷嚏、鼻痒抓鼻次数)。(2)经HE染色后,光学显微镜下观察各组大鼠肺组织病理形态学的变化。 1.3 差xs表达 数据分析采用SPSS 11.5统计分析软件完成,数据采用均数±标准差(xˉ±s)(xˉ±s)表达,采用多样本比较的秩和检验(Kruskal-Wallis H)分析,组间多重比较采用Nemenyi法检验。显著性水准取α=0.05(双侧),P0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 感冒症状及分析 各组大鼠激发后行为变化:对照组大鼠头部轻度瘙痒,活动如常,反应灵敏,呼吸平稳;模型组大鼠在激发2～3 min后出现明显烦躁不安,鼻部瘙痒抓鼻,频繁喷嚏,流鼻涕,进而呼吸加深、加快,跌倒,少动,点头呼吸,呈哮喘样表现,症状持续约1 h左右;地塞米松组、肺俞膻中肾俞组大鼠在激发7～8 min后出现喘息,且6～8 min后哮喘症状明显减轻,表现为点头呼吸消失,运动增多;肺俞膻中组