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小麦生态区抗病性菌的鉴定及其核心种质的利用 小麦粉末（cd.）f.sp.trime.o.sper（syn.erisyp.h.f.s.t.出版物）引起的急性疾病。近30年,由于小麦生产条件改善、感病品种种植和病菌毒力结构变异等原因,致使小麦白粉病从我国西南和东南沿海局部地区迅速蔓延至全国几乎所有麦区,发病面积从1980年的100万公顷扩展到2010年的650万公顷。 鉴于白粉病对全国小麦安全生产构成了严重的威胁,我国十分重视抗白粉病的品种选育,特别是20世纪70年代引进的小麦-黑麦T1BL·1RS易位系所携带的Pm8基因被广泛利用,在一个时期有效地降低了白粉病造成的经济损失。这个易位系的黑麦1RS染色体臂上还携带与Pm8基因连锁的Yr9、Lr26和Sr36等抗条锈病、叶锈病和秆锈病基因,并且还具有高产和广适性等优异性状,对我国乃至全世界小麦抗病育种都产生了深远的影响。但是,由于生产上过度依赖Pm8基因,导致小麦白粉病菌中对该基因的毒力频率迅速上升。1990—1991年我国白粉病大流行的一个原因就是Pm8基因抗病性的丧失。 在利用已知抗白粉病基因(如Pm4a等)的同时,为了丰富小麦白粉病抗源,我国还加强了抗白粉病新基因的发掘与抗病种质的创新。例如,从簇毛麦转移到小麦的Pm21基因,抗谱广、抗性强,用其培育的小麦品种已经在生产上发挥作用。 本研究旨在通过苗期和田间成株期接种鉴定,研究我国不同时期国家审定(认定)的小麦品种对当前白粉病不同毒力菌株的反应;通过鉴定近年来育成品种(系)对白粉病的抗性,明确我国小麦抗白粉病育种的潜力;通过鉴定小麦核心种质的抗病性,研究我国小麦种质资源的白粉病抗性状况;同时,利用与抗病基因连锁的分子标记检测小麦品种的抗白粉病基因背景,了解有关抗病基因在我国小麦品种中利用状况。本研究的结果将有助于小麦抗白粉病育种中亲本选择、抗病资源发掘利用、抗病品种布局和白粉病田间控制策略的制定。 1 材料和方法 1.1 小麦品种及对照品种 供试小麦材料包括148份近30年国家审定(认定)的小麦品种(见附表),161份2008—2010年参加国家区域试验的小麦品种或品系,以及由1 160份材料组成的小麦核心种质和263份材料组成的小麦微核心种质。小麦感病对照品种为中作9504和京双16。另外,含有已知抗白粉病基因的品种或品系用于白粉病菌毒力谱的分析(表2)。 1.2 育苗鉴定方法 具不同毒性谱的白粉菌菌株采自我国不同小麦产区,经单孢子堆分离后保存。这些菌株均能够克服Pm3a、Pm3b、Pm3e、Pm5a和Pm1+2+9基因或基因组合,但对Pm1c、Pm13、Pm20、Pm21、Pm24、Pm2+6和Pm5+6基因或基因组合均表现无毒(表1)。感病对照品种中作9504和京双16对所有测试菌株均表现高感。 苗期接种鉴定方法是将待测品种播种于5×10孔的塑料育苗盘中,每孔(5 cm×5 cm)播种10粒。当植株第1片叶完全展开后,采用扫拂法充分接上在感病品种中作9504上新繁殖的白粉菌分生孢子,保湿24 h,然后在18~20°C条件下生长,待感病对照品种充分发病时,采用0~4级标准调查第1叶片的反应型。反应型0~2为抗病,3~4为感病。 成株期抗病鉴定在中国农业科学院作物科学研究所北京昌平试验站进行,每个品种播种1行,每行30粒,每隔20行播种1行感病对照品种京双16,同时在试验区播种中作9504作为接种行。春天小麦返青后,在接种行上接种混合菌株(毒力谱为V1、V3a、V3b、V3c、V3d、V3e、V3f、V4a、V4b、V5、V6、V7、V8、V17、V19、V23、V24、V25、V30、V34和V35)菌株。乳熟期采用0~9级标准调查病害的严重度,其中0级为免疫,1~2级为高抗,3~4级为中抗,5~6级为中感,7~9级为高感。 1.3 抗-cc-3e-pm8基因的扩增 利用1RS上的ω-黑麦碱基因(ω-sec-P1:5′-ACC TCCTCATCTTTGTCCT-3′;ω-sec-P2:5′-CCGATGC CTATACCACTACT-3′)和1BS上的Glu-B1基因(011B3F:5′-GTTGCTGCTGAGGTTGGTTC-3′;011B3R:011B3R 5′-GTTGCTGCTGAGGTTGGTTC-3′)的特异分子标记检测材料中携带Pm8基因的T1BL·1RS易位。利用已知抗病基因Pm4a(Xgwm356 F:5′-AGCGTTCTTGGGAATTAGAGA-3′;Xgwm356R:5′-CCAATCAGCCTGCAACAAC-3′)和Pm21基因(Xcau127 F:5′-TAGAGCAATCCAACTCACGC-3′;Xcau127 R:5′-AAGGGACTGACCCATCAGC-3′)的特异分子标记检