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血清降钙素原检测在肺部感染诊断中的意义
钙原(pct)由116个氨基酸组成的糖蛋白,相对分子量为14。5.103,cacl-1的编码代码。氨基酸序列157为n-残段,60.91为钙ct,96.116为钙献。在正常生理状态下,PCT由甲状腺C细胞分泌,在特异性蛋白酶作用下经过细胞内蛋白水解产生具有生物活性的降钙素,是血清降钙素的前肽物质,无激素活性,可产生多种生物效应。正常情况下,循环血清中的PCT水平低于0.1 ng/mL,在感染性休克时,血清PCT水平可以升高到30~1 000 ng/mL。认为其是比C反应蛋白更好的预测指标。
最新研究表明,PCT作用于中性粒细胞,起到促炎作用,但不能抑制细菌内毒素在体外应答的诱导。也有研究指出,在病毒感染时,干扰素大量产生,将会抑制PCT的激活及产生。因此,病毒感染时PCT的浓度会保持在较低水平。临床上,PCT可用于细菌感染与病毒感染的早期鉴别诊断。
1 仪器与检测方法
1.1一般资料 该院2010年3~7月ICU病房及呼吸科住院患者中确诊的肺部感染60例,其中男37例,女23例。健康对照组30例,均为体检合格者,且血象和胸片检查无异常。
1.2仪器与试剂 SYSMEX-2100全自动血细胞分析仪及配套试剂,日本西斯美康株式会社提供。mini VIDAS荧光免疫分析仪以及降钙素原测定试剂盒,法国生物梅里埃有限公司提供。
1.3方法 取急性期感染患者静脉血2 mL置EDTA-K2真空抗凝管中,轻轻颠倒混匀,尽快送检,进行全血细胞分析检测,使用SYSMEX-2100仪器检测白细胞分类计数与百分比。同时取静脉血3 mL置肝素真空抗凝管中,3 000 r/min 离心15 min,取上清液200 μL,加入PCT检测反应板,双抗体夹心法检测PCT抗原,30 min后读取结果。参考范围设定PCT0.05 ng/mL。追踪病例胸片及痰培养细菌鉴定结果。
1.4统计学处理 采用两样本均值比较的t检验,用SPSS 11.5统计学软件进行数据统计,结果以(xˉ±s)(xˉ±s)表示。
2 结果
2.1 表1显示了两组pct和白细胞分类的百分比
2.2 表2显示了两组pct和白细胞分类的结果
2.3 图1和图2显示了pct和中性细胞之间的比例相对于伤口的图1和图2
2.4 图3显示了pct与中性细胞数量之间的关系
2.51 图4显示了在治疗脓毒症的过程中pct水平的变化与白细胞总数之间的关系
3 影像学检测及pct水平检测
自1993年国外首次报道血清降钙素原与细菌感染有关以来,PCT被认为是细菌感染和脓毒血症的良好标志物,成为临床诊断中的重要工具。PCT水平的增高反映了从健康状态到细菌感染最严重后果(脓毒血症、严重脓毒症、脓毒性休克)的持续发展,呈正相关性。
临床上全身炎性反应综合征(systemic inflammatory response,SIRS)的表征无特异性,很多非脓毒症的患者也会出现该表征。临床诊断:体温大于38 ℃或小于36 ℃;心率大于90/min;呼吸急促大于20 min;白细胞计数大于12 000或小于4 000×109/L。对于感染诊断的金标准:病原培养,微生物学对感染的检测通常是阴性,或需要较长时间才获得结果。不但细菌培养时间较长,且不一定能反映全身炎性的主体反应或器官机能障碍的出现。而PCT在败血症发生时以1.1 ng/mL为临界敏感性达81%,特异性达72%。合并SIRS时,可以分别提高到100%和86%。因此,PCT以其高敏感性、高特异性、实验快速等特点,受到临床的重视。
本研究选取ICU和呼吸科确诊为肺部感染的患者为研究对象。患者有明显肺实变体征、湿性啰音、呼吸道症状严重,出现脓性痰。83%患者胸部X线显示片状、斑片状浸润性阴影或间质性改变,伴或不伴胸腔积液,影像学诊断为肺部感染。患者在炎性急性期留取痰标本进行细菌学培养,62%标本于3 d后呈阳性结果。
所有患者同时取静脉血进行白细胞分类计数和PCT定量检测,此前关于PCT的文献报道多集中于半定量固相免疫测定方法检测,准确度和灵敏度都有待提高。本研究采用双抗体夹心荧光定量检测,所有检测可在30 min内完成。患者组PCT浓度(3.94±1.81)ng/ml明显高于健康对照组(0.05 ng/mL)。患者组WBC计数、中性粒细胞百分比(13.27±8.20)%和数量(11.47±2.82)×109/L均显著高于健康对照组[(7.25±4.37)%和(5.25±1.98)×109/L]。而患者组其他类型白细胞百分比和计数则显著低于健康对照组。
本研究选取的60例肺炎患者标本中,PCT水平范围为0.11~48.28 ng/mL,对应的中性粒细胞变化范围集中在75%~100%,其中中性粒细胞百分比变化超过参考值(50%~75%)
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