姬松茸多糖对哮喘模型小鼠气道炎症和h2类细胞因子水平的影响.docxVIP

姬松茸多糖对哮喘模型小鼠气道炎症和h2类细胞因子水平的影响 气管哮喘是由嗜酸性粒细胞、大细胞、淋巴氏合金等疾病细胞参与的呼吸道慢性炎症。当th1和th2的免疫平衡受到破坏时，th2占主导地位后，th2细胞将通过释放白色介质素（il）-4、il-5和il-13等炎症细胞因子，促进ige的形成和释放，以及嗜酸性细胞的聚集和激活，诱导玻璃细胞过度分泌。加剧呼吸道炎症的发生。因此，减少th2炎症细胞因子是哮喘免疫治疗的研究热点。季松又名胡普，属于亚硝泮、层菌、伞菌、蘑菇科和蘑菇科。它来自巴西，是一种食品菌。它的深层发酵体和发芽液中含有各种生物活动，其中糖作为主要活性物质。结果表明，季松糖能降低血压，肿瘤、辐射和氧化反应。初始研究结果表明，季松糖对大鼠呼吸道炎症和th2细胞因子水平的影响具有抑制作用。 1 材料和方法 1.1 细胞因子及仪器 实验动物选择雌性Balb/c小鼠40只, 体质量为 (18±4) g, 由延边大学实验动物中心提供, 合格证号为SCXK (吉) 2011-0007.卵清蛋白 (OVA) 及氢氧化铝粉均购自美国Sigma公司;细胞因子IL-4, IL-5, IL-13检测试剂盒均购自长春百奥生物有限公司.仪器:雾化吸入器 (大连医疗器械厂U219, 欧姆龙) ;酶联免疫检测仪 (RT-2100C, 美国) .姬松茸多糖由延边大学药学院郑昌吉副教授提供. 1.2 方法 1.2.1 动物和组成 选择雌性Balb/c小鼠40只, 按照随机数字表法分为4个组, 即正常对照组、哮喘模型组、姬松茸多糖小、大剂量组, 每组各为10只. 1.2.4 肺组织病理学的观察 取左肺常规固定、脱水、包埋、切片、HE和三色染色, 观察肺组织病理学改变. 1.2.5 统计学处理 采用SPSS14.0统计软件进行数据分析.实验数据以均数±标准偏差表示, 多组均数比较采用单因素方差分析, 其样本均数之间的两两比较采用LSD法, 以P0.05为差异有统计学意义. 2 结果 2.1 嗜酸性事业细胞、淋巴细胞计数变化 与正常对照组比较, 哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞总数及中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞计数均明显升高 (P0.05) ;与哮喘模型组比较, 姬松茸多糖小、大剂量组小鼠BALF中炎症细胞总数及中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞计数均明显降低 (P0.05) .见表1. 2.2 il-13、il-13水平 与正常对照组比较, 哮喘模型组小鼠BALF中IL-4, IL-5, IL-13水平均明显升高 (P0.05) ;与哮喘模型组比较, 姬松茸多糖小、大剂量组小鼠BALF中细胞因子IL-4, IL-5, IL-13水平均明显降低 (P0.05) .见表2. 2.3 对小鼠肺组织病理学改变的影响 正常对照组小鼠肺组织无明显病理学改变.哮喘模型组小鼠肺组织切片HE染色观察可见支气管管腔狭窄、上皮细胞损伤、支气管及血管周围有大量炎症细胞浸润, 以嗜酸性粒细胞为主.姬松茸多糖小、大剂量组小鼠肺组织病理学改变与哮喘模型组相比较明显减轻.见图1. 3 不同模型小鼠th2和il-13变化 支气管哮喘的主要发病机制为Th1/Th2细胞因子免疫平衡被破坏, Th1反应减弱, Th2反应增强从而释放IL-4, IL-5, IL-13等炎症细胞因子所致.Th2细胞亚群主要释放IL-4, IL-5, IL-13等炎症细胞因子, 可诱导嗜酸性粒细胞的产生和聚集, 协助B细胞产生IgE等抗体, 介导体液免疫应答及Ⅰ型变态反应.本实验采用哮喘模型观察了Th2型细胞因子IL-4, IL-5, IL-13的水平变化, 结果表明哮喘模型组小鼠IL-4, IL-5, IL-13水平均明显升高, 提示Th2优势显著.本实验结果亦表明, 姬松茸多糖干预后, 不仅肺组织病理学改变较哮喘模型组显着减轻, 且小鼠BALF中炎症细胞数计数、IL-4, IL-5, IL-13水平均明显降低, 提示姬松茸多糖对哮喘模型小鼠具有保护作用, 其机制可能与下调Th2优势、减少炎症细胞浸润有关. 1.2.2 对姬松茸多糖的诱导 实验样本的获取与处理参照文献中的方法.除正常对照组小鼠外, 其他各组小鼠分别从第1, 14d开始致敏, 每只小鼠腹腔注射给予混合液 (OVA 20μg、氢氧化铝凝胶1 mg) 200μL.在致敏后的第21, 22, 23 d, 分别雾化吸入给予1% (体积分数) OVA溶液20 min.正常对照组以给予生理盐水代替OVA进行腹腔注射及雾化吸入.姬松茸多糖小、大剂量组于致敏后第17~23 d分别灌胃给予姬松茸多糖200, 400 mg/kg进行治疗, 对照组和哮喘模型组分别灌胃给予同等剂量的生理盐水, 灌胃1 h后给予雾化吸入.最后1次雾化吸入结束48 h后将小鼠处死.以PB