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不同施肥方式对玉米土壤微生物量氮动态的影响 0 施肥对土壤微生物量氮的影响 【研究意义】微生物量氮的活性及其长度是土壤氮素内循环的本质化内容。许多问题（如有机无机肥的联合应用）以及不同问题（如氮的有效性和氮损失）之间的关系紧密分离。有关氮素转化和供肥特征(能力)等一些机理问题目前不十分清楚。所有这些都需要弄清微生物量氮在其中所起的作用。研究有机肥与化肥配合施用土壤微生物量氮的动态、来源和供氮特征对揭示微生物量氮在植物营养和土壤氮素肥力中的作用有重要意义。【前人研究进展】土壤氮(包括施入的肥料氮)的微生物矿化和固持是同时发生在土壤氮素循环中的两个重要过程,而微生物既是这两个过程的执行者,又是植物营养元素的活性库[1~3]。施化肥可以对土壤中的有机氮起更新作用,而有机肥可以提高土壤全氮水平。长期施用有机肥,土壤微生物量氮会持续增高,微生物吸收同化氮,组成微生物量氮,其分解释放的氮绝大部分可被植物吸收利用。微生物对施入氮的固持与释放,主要受施入的碳(如有机肥)和氮所支配,而土壤残留的肥料氮中约有24%~27%存在于生物量中,因此其有效性比较高。【本研究切入点】但是传统的研究方法仅限于讨论不同施肥方式下土壤微生物量氮的数量和动态变化,以及与氮肥有效性之间的关系,没有揭示不同施肥措施土壤微生物量氮数量大小差异的深层原因,即土壤微生物量氮的来源及其在作物生育期间来源的动态变化。【拟解决的关键问题】通过15N同位素示踪技术研究秸秆直接还田,秸秆过腹还田等施肥方式下,土壤微生物量氮在玉米的不同生育阶段的动态变化以及土壤、有机肥和化肥对土壤微生物量氮的贡献,微生物量氮对作物的供氮量,阐明有机物料与化肥配施后土壤中氮的动态变化及其供氮特征。将有助于揭示土壤中氮的矿化-固持周转过程机理,为合理施肥和培肥土壤氮素肥力,实现农业生态系统养分的良性循环提供科学依据。 1 材料和方法 1.1 试验时间和地点 本研究培养试验和室内分析于2001~2003年在沈阳农业大学进行。同位素分析于2004年在中国农业科学院原子能研究所进行。 1.2 玉米小麦 供试化肥为普通硫铵和15N标记硫铵,磷、钾肥用普通过磷酸钙和硫酸钾。供试有机物料,采用15N标记和非标记的玉米、小麦秸秆和猪粪,具体做法如下:利用普通(NH4)2SO4和(15NH4)2SO4(丰度24.63%)分别培养玉米和小麦,制备标记和非标记秸秆、籽实物料(室内进行),粉碎,一部分茎叶作为秸秆还田,另一部分籽实和茎叶饲喂猪制备标记猪粪和普通猪粪,收集猪粪并腐熟后备用。15N标记硫铵由上海化工研究院提供,丰度6.457%;标记猪粪含氮2.98%,15N丰度1.112%;普通猪粪含氮2.73%;标记玉米秸含氮2.28%,15N丰度1.187%;普通玉米秸含氮2.08%;标记小麦秸含氮2.13%,15N丰度4.686%;普通小麦秸含氮2.03%。供试作物:春玉米(品种农大108)。供试土壤:棕壤,采自沈阳农业大学后山棕壤长期定位试验地(耕层0~20 cm),是松辽平原南部农业生产的主要土壤类型,中等肥力。 1.3 测试方法 1.3.1 试验设计 1.3.2 微生物量氮的提取与浓缩 (1)土壤微生物量氮测定:根据Brookes提出的方法,采用氯仿灭菌提取法,具体步骤如下:称取过5 mm筛的新鲜土样50 g(相当于40 g干土)于100ml培养皿中,25℃条件下在真空干燥器中用氯仿抽气灭菌24 h。用反复抽真空方法除去残余氯仿,然后用150 ml 0.5 mol·L-1K2SO4溶液将土壤转移到250 ml塑料离心管中,振荡30 min,滤液用凯氏法消煮,测定提取液中全氮含量。同时以未灭菌土壤0.5 mol·L-1K2SO4溶液提取的全氮为对照。根据下式计算微生物量氮:Biomass-N=2.22EN(EN为灭菌与不灭菌土壤以0.5 mol·L-1K2SO4提取液全氮含量之差;2.22为KN=0.57时经验比例系数)。微生物量氮的丰度通过测定土壤灭菌前和灭菌后土壤浸提液氮丰度,根据同位素稀释原理计算得出,计算公式:微生物量氮丰度=(N灭菌/14×丰度灭菌-N未灭菌/14×丰度未灭菌)/(EN/14) (2)植物全氮H2SO4-H2O2消煮,半微量凯氏定氮。 (3)对所有氮测定项目,蒸馏后馏出液酸化浓缩用于15N丰度测定,为消除交叉污染,每蒸馏一标记氮组分后均用酒精空蒸,以降低的“15N”记忆效应。15N丰度测定仪器用菲尼根MAT251超精度气体同位素质谱仪。 2 结果与分析 2.1 不同处理玉米孕穗期土壤微生物量的变化 土壤微生物量氮是土壤有机氮的重要组成部分,它的数量虽少,但却控制着土壤中碳、氮养分循环,对土壤有机质含量、氮磷钾硫等养分的供给以及有机无机养分转化起重要作用[10~12]。不同有机肥和化肥配合施用对