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小儿健脾肠泰口服液质量标准研究 儿童健脾肠泰口服是科技部根据该项目协助开发的一个南药品种。它由葛根、椰子林、猪苓、腹泻、香蕉籽、白术和番木瓜组成。具有益脾除湿、益水止泻的功效，用于治疗儿童腹泻。为了保证药品的质量,我们采用薄层色谱法,对方中的主要药物白术、泽泻、葛根进行了鉴别,同时采用高效液相色谱法,对方中的君药葛根进行了含量测定。 1 小肠泰口服液200mm Agilent1100高效液相色谱仪;色谱柱:CLC-ODS(250×4.6 mm,10 μm);微量进样品(上海医用激光仪器厂)。薄层层析硅胶G(60型)(中国青岛海洋化工集团公司出品);薄层层析缸(100×200 mm)(上海信谊仪器厂);微量进样品(上海安亭微量进样器厂)。小儿肠泰口服液自制,批号为0701201;阴性对照液自制(按处方药味除去被测药材,并按成方工艺及供试品溶液的制备方法制备);白术(批号120925-200707)、泽泻(批号:120983-200503)、葛根素(批号:0752-200708),伏苓(批号:0932-200902),均购于中国药品生物制品检定所,甲醇为色谱纯,水为重蒸馏水,其它试剂均为分析纯。 2 为实现性别鉴定，采用膜色谱法进行定性认证 2.1 对照药材的制备 取本品20 mL,置分液漏斗中,用氯仿振摇提取2次,每次30 mL,合并氯仿液,蒸干,残渣加氯仿1 mL使溶解,作为供试品溶液。另取白术对照药材1.5 g,加水50 mL,加热煎煮30 min,滤过,滤液置分液漏斗中,按上述方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各10 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷-苯-醋酸乙酯(14︰3︰3)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,在105℃加热约3 min,置紫外光灯下检视。供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,阴性样品无干扰。 2.2 照药材溶液 取泽泻对照药材2 g,加水50 mL,加热煎煮30 min,滤过,滤液按鉴别2.1项下供试品溶液同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取鉴别(1)项下的供试品溶液与上述对照药材溶液各10 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯-丙酮(6︰1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,在105℃加热约3 min。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的紫红色斑点。 2.3 氯甲烷-甲醇-水3.2.5% 取本品作为供试品溶液。另取葛根素对照品,加甲醇制成每1 mL中含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述两种溶液各1 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(7︰2.5︰0.25)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的蓝色荧光斑点。 2.4 香草醛硫酸-乙酸乙酯-甲醛对照法 取本品10 mL,用50 mL乙醚萃取两次,合并萃取液,水浴蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液;另取茯苓对照药材的粉末1 g,加乙醚50 mL,超声处理10 min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为对照药材溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验,吸取上述两种溶液各2 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶5∶0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2%香草醛硫酸-乙醇(4∶1)混合溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点。 3 葛根素的含量测定 3.1 检测波长和温度 色谱柱:CLC-ODS(250×4.6 mm,10 μm),流动相:甲醇-pH3.0(HAc调)水(25∶5),检测波长:250 nm,流速:1 mL/min,柱温:25℃。研究中发现葛根素保留时间随着温度的变化有显著性变化,根据试验结果,选择柱温为25℃。见表1。 3.2 对照溶液的制备 精密称取干燥至恒重的葛根素对照品15 mg,置50 mL容量瓶中,加95%乙醇定容,摇匀,即得(浓度为0.30 mg/ml)。 3.3 续滤ld50 精密吸取本品1.0 mL(约含葛根药材0.15 g),置于25 mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,用0.45 μm微孔滤膜滤过,弃去初滤液,收集续滤液即得。 3.4 阴性溶液的制备 除去葛根,模拟工艺,制得葛根的阴性对照品,按供试品溶液制备方法,制得阴性对照品溶液。 3.5 与邻近色谱峰的分离度 在选定条件下,供试品中葛根素可与其他组分基线分离,与邻近色谱峰的分离度按葛根素峰计算,理论塔板数按葛根素峰计为5874,分离度为2.48,R1.