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云南丽江3个牡丹品种叶微形态结构比较 叶片是植物进化过程中对环境变化敏感且可塑性强的器官。不同的选择压力下，可以形成各种适应形状。该结构特征可以反映环境因子的影响或植物对环境的适应性。研究植物叶片形态解剖结构对环境变化的响应与适应是探索植物对环境变化的适应机制和制定相应对策的基础。中国栽培牡丹Paeonia suffruticosa品种资源丰富,品种遗传背景复杂,依据品种起源及生态习性差异主要划分为四大品种群:中原牡丹品种群、西北牡丹品种群、江南牡丹品种群和西南牡丹品种群。中原牡丹品种群和西北牡丹品种群性喜冷凉干燥,江南牡丹品种群性喜高温多湿,西南牡丹品种群性喜冷凉湿润。云南牡丹品种亚群是西南牡丹品种群的重要组成部分,多数品种植株高大,花色鲜艳,高度重瓣化,具有较高的园林开发应用价值。云南本地牡丹品种性喜高湿,对南方夏秋高湿环境的适应能力较强,较中原牡丹品种喜冷凉干燥的习性有着本质差异。本项研究选取滇中公园引种栽培的3个云南牡丹品种(丽江牡丹)和中原牡丹3个代表品种进行叶形态解剖特征比较研究,选用最能够反映植物对环境水分和湿度条件的适应状况的主要结构指标:叶肉栅栏组织和海绵组织、气孔数量和内部导管大小进行对比分析,以期能对这一亚群品种的耐湿习性进行验证说明,为其引种栽培管理提供相关依据。 1 干季明显 云南省武定县(25°30′~26°11′N,101°55′~102°28′E)属半湿润亚热带高原季风气候类型,年温差不大,干湿季明显。栽培地是狮子山公园,海拔为2 240 m,年平均气温为13.2℃,最冷月1月均温4.2℃,最热月7月均温17.5℃,年均日照时数2 326.2 h,年降水量1 104.1 mm,5-9月降水量占全年降水总量的90.0%左右,雨季大气相对湿度为82.0%,而旱季降水量仅占全年的10.0%。 2 内容和方法的研究 2.1 paeonisuffratch模型 供试材料为生长健壮、株龄相当的当年生牡丹枝条,取其节位相同的成熟叶片。云南丽江牡丹品种1为‘丽江粉’Paeonia suffruticosa‘Lijiangfen’,品种2为‘丽江紫’Paeonia suffruticosa‘Lijiangzi’,品种3为‘香玉板’Paeonia suffruticosa‘Xiangyuban’,中原牡丹品种‘乌龙捧盛’Paeonia suffruticosa‘Wulongpensheng’,‘青龙卧墨池’Paeonia suffruticosa‘Qinlongwomochi’和‘首案红’Paeonia suffruticosa‘Shouanhong’。 2.2 叶肉形态及形态观察 叶表皮形态观察:将成熟叶片用甲醛-醋酸-乙醇溶液(FAA)固定液浸泡,浸泡之后在60℃烘箱里解离,约30 min,用清水浸泡材料后,沿叶中脉部位撕下叶上下表皮。 将撕下叶表皮用20.0 g·L-1亚甲基蓝染色,着色后采用逐级乙醇脱水法,经二甲苯透明,中性树胶封片。制成的片子在Nikon-E400生物摄像显微镜下拍照。细胞形态及气孔类型划分依据王宇飞方法。 叶肉解剖特征比较:植物的叶肉形态解剖研究采用石蜡切片法,切片采用番红-固绿对染观察细胞结构,在Nikon-E400生物摄像显微镜下拍照。观察栅栏组织和海绵组织的形态。 2.3 气孔大小及导管数量测量 将制好的片子在Olympus光学显微镜下观测,统计下列指标: 表皮细胞的形状与大小:放大10×40时,随机观察叶片上下表皮中部50个细胞的形状,用测微尺测量其长与宽,求其平均值。 气孔大小:放大10×40时,用测微尺随机测量50个气孔大小,求其平均值。 气孔密度:放大10×10时,随机观测统计叶片中部25个视野中1 mm2内的气孔器数目,求其平均值。 气孔指数:I=[S/(S+P)]×100,其中S,P分别为放大10×40时随机观察的叶片中部视野的气孔数目(S)和表皮细胞数目(P),共观察20个视野,求I平均值。 海栅比测定:用测微尺随机测量25组栅栏组织的长度和海绵组织的宽度,计算海绵组织与栅栏组织的比值。 导管数量和大小测量:放大10×40时,随机观测统计叶片中脉25个视野下,导管的列数;选取导管10个·视野-1测量内径,取平均值。 3 结果与分析 3.1 上表皮细胞排列 6个牡丹品种的叶表皮细胞形状都为矩形(长宽比为1.5~2.5),表皮细胞为不规则型,成多角形(图1-1~3)。丽江牡丹叶上皮细胞较中原牡丹品种要长些。 丽江粉上表皮细胞的长为114.91μm,宽为55.78μm,长宽比值为2.06;丽江紫的上表皮细胞的长为75.33μm,宽为35.43μm,长宽比值为2.19;香玉板的上表皮细胞的长为104.74μm,宽为54.55μm,长宽比值为1.92。3个品种的表皮细胞排列紧