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圆叶型菜心核基因雄性不育系的选育 心脏病是指十字花科的一个杂种植物。它是由花和幼芽组成的植物。它是中国南方最重要的蔬菜种类之一。由于未能开发出适宜的杂交制种方法,菜心的杂种优势迄今未能得到很地好利用,生产上应用的几乎都是常规品种。许明等、刘自珠等、赵利民等曾尝试转育大白菜和甘蓝型油菜的雄性不育细胞质,但转成的不育系或是由于不育性不稳定,或是因伴生有黄化和结籽不良等不良性状,所以至今未能在杂交制种上得到应用。多数研究者认为利用自交不亲和系配制菜心一代杂种是比较有效和实用的手段,但由于菜心的自交不亲和性不够稳定而难以利用。 冯辉等于1995年在大白菜中发现的细胞核复等位基因型雄性不育材料,具有不育株率和不育度均达到100%且无不良性状伴生等优点,受到了育种工作者的广泛关注。为了扩大该类不育材料的应用范围,一些学者采用有性杂交法,将不育基因转入多种生态型的大白菜、小白菜和奶白菜中,育成了新的核不育系。许明等、王玉刚等和刘镜等分别以大白菜核复等位基因型雄性不育系为不育源,转育成了菜心核基因雄性不育系,但由于用其试配的杂交组合整齐性差、经济性状不良,因而并未在生产上得到应用。李石等和张秀荣等报道转育出了经济性状优异的菜心雄性不育“两用系”和“临时保持系”,但迄今未见用其配成不育系的报道。 本试验以本项研究前期转育成的柳叶型菜心核不育系“GMS201”为不育源,设计定向转育方案,向圆叶型菜心品系“奇2”中转育核不育基因,育成了不育株率和不育度均为100%、园艺学性状与“奇2”相近的菜心核基因雄性不育系,现将研究结果报道如下。 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 不育的原因 沈阳农业大学育成的柳叶型菜心核不育系“GMS201”及其相应的两用系“AB201”和临时保持系“B201”。 1.1.2 目标转移序列 圆叶型菜心品系“奇2”,来自广东省农业科学院。 1.1.3 试验用“新-2”品种 自交系D1(“四季油青”)、自交系D2(“019菜心”)、自交系D3(“粗条矮脚80天”)、自交系D4(“油青矮脚70天甜菜心”)和自交系D5(“菜富城8号甜菜心”),以及品种比较试验中的对照品种“新-2”,均来自广东省农业科学院。 1.2 转育、育种及品种选择试验 试验于2006-2009年在沈阳农业大学蔬菜遗传育种试验基地进行。 根据核复等位基因型雄性不育的遗传特性,首先鉴定转育目标品系的基因型,然后设计定向转育方案,采用杂交、回交和测交方法,转育核不育基因及其他性状,鉴定基因型。 利用转育成的不育系试配杂交组合,进行品种比较试验。随机区组设计,3次重复,小区面积1.8 m2,每小区60株。 样本容量按公式n≥lg(0.01)/lg(1-p)计算,其中p为目标基因发生概率;适合性测验按公式χ2=[|A-ra|-(r+1)/2]2/rn计算,其中A和a分别为显性组和隐性组的实际观察次数,n(n=A+a)为总次数,r为理论分离比率。 2 结果与分析 2.1 雄性不育的位点 试验所用的柳叶型菜心核不育系“GMS201”及其两用系“AB201”和临时保持系“B201”的不育性属于复等位基因遗传。根据“核基因雄性不育复等位基因遗传假说”,其不育性与细胞核1个位点的3个基因有关。其中Ms为显性不育基因,ms为Ms的等位隐性可育基因,Msf为Ms的等位显性恢复基因,三者之间的显隐关系为MsfMsms。具有100%不育株率的雄性不育系,是由雄性不育“两用系”的不育株与“临时保持系”杂交得到的。“两用系”不育株基因型为MsMs,可育株为MsfMs,其通过不育株与可育株兄妹交繁殖(MsMs×MsfMs→1/2MsMs,1/2MsfMs);“临时保持系”基因型为msms。用“两用系”不育株(MsMs)与“临时保持系”(msms)交配,便可获得具有100%不育株率的雄性不育系(MsMs×msms→Msms)。 2.2 坚果育种和育种 2.2.1 转育目标品系的基因型鉴定 一般可育品系在核不育位点上的基因型有3种:MsfMsf、Msfms和msms。用雄性不育“两用系”的不育株(MsMs)与转育目标品系杂交,根据后代育性分离比率可以鉴定其基因型,即有: ΜsΜs×{ΜsfΜsf→ΜsfΜs,全可育;Μsfms→ΜsfΜs?Μsms,1∶1(可育∶不育);msms→Μsms,全不育。 以柳叶型菜心“两用系”的不育株“AB201”(MsMs)为母本,与转育目标品系“奇2”杂交,获得的92株F1植株全部为可育株,说明“奇2”的基因型为MsfMsf。 2.2.2 遗传转移 以柳叶型菜心核不育系“GMS201”(Msms)为不育源,转育“奇2”菜心(MsfMsf)核不育系的遗传模式见图1。 2.2.3 生长、杂交和自交系建立 首先以“GMS201”(Msms)为母本与“奇2”