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蛋白质构造10/10/20231第1页 2.3.1 蛋白质一级构造2.3.2 蛋白质二级构造2.3.4 蛋白质四级构造2.3.3 蛋白质三级构造【主要内容】：§2.3 蛋白质分子构造10/10/20232第2页 蛋白质构造分为： 一级构造、二级构造、三级构造、四级构造。 在二、三级构造间划分出超二级构造和构造域。10/10/20233第3页 蛋白质一、二、三、四级构造10/10/20234第4页 2.3.1 蛋白质一级构造一、蛋白质一级构造 蛋白质一级构造（Primary structure）又称为共价构造或化学构造。 是指蛋白质中氨基酸排列次序。（一）肽键与肽链1.肽键：一种氨基酸α-COOH 和相邻另一种氨基酸 α-NH2脱水形成共价键。如下列图：10/10/20235第5页 10/10/20236第6页 肽键和肽构造10/10/20237第7页 2. 氨基酸借肽键连接起来叫肽； 1）两个氨基酸组成肽叫二肽；2）三个氨基酸组成肽叫三肽；3）多种氨基酸组成肽叫多肽；4）氨基酸借肽键连成长链，称为肽链，肽链两端有 自由-NH2和-COOH，自由-NH2端称为N-末端（氨基末端）， 自由-COOH端称为C-末端（羧基末端）；5）组成肽链氨基酸已残缺不全，称为氨基酸残基；6）肽链中氨基酸排列次序，一般-NH2端开始，由N指 向C，即多肽链有方向性，N端为头，C端为尾。10/10/20238第8页 （二）天然活性肽 (理解)自然界中有自由存在活性肽，主要有：1. 谷胱甘肽（GSH）：三肽（Glu-Cys-Gly），广泛存在于生物细胞中，具有自由巯基，具有很强还原性，可作为体内主要还原剂，保护某些蛋白质或酶分子中巯基免遭氧化，使其处于活性状态。 10/10/20239第9页 10/10/202310第10页 2.促甲状腺素释放激素：三肽（焦谷氨酰组氨酰脯氨酸），可促进甲状腺素释放。 3.短杆菌素S：环十肽，具有D-苯丙氨酸、鸟氨酸，对革兰氏阴性细菌有破坏作用，主要作用于细胞膜。 4.青霉素：具有D—半胱氨酸和D—缬氨酸二肽衍生物 。主要破坏细菌细胞壁粘肽合成引发溶菌。 10/10/202311第11页 5.牛催产素与加压素：均为九肽，分子中具有一对二硫键，二者构造类似。前者可刺激子宫收缩，促进分娩。后者可促进小动脉收缩，使血压升高，也有抗利尿作用，参与水、盐代谢调整。 牛催产素 : S S Cys·Tyr·Ile·Gln·Asn·Cys·Pro·Leu·Gly-NH2牛加压素 :7.脑啡肽：为五肽，具有镇痛作用。 S S Cys·Tyr·Phe·Gln·Asn·Cys·Pro·Ary·Gly-NH26.舒缓激肽：促进血管舒张，促进水、钠离子排出。10/10/202312第12页 10/10/202313第13页 （三）蛋白质一级构造研究 一级结构研究包括：蛋白质氨基酸组成测定，肽链数目标确定，末端氨基酸种类测定，氨基酸排列顺序测定，二硫键位置测定，酰胺位置确定。大体步骤如下： 1.获取一定量纯蛋白质样品，测其分子量，然后将样品完全水解，确定该蛋白质氨基酸种类、数目及每种氨基酸含量。2.进行末端测定，确定该蛋白质肽链数目，N-端和C-端是什么氨基酸。 N-末端测定法：常采取2，4—二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。 C-末端测定法：常采取肼解法、羧肽酶法。p3910/10/202314第14页 3.肽链拆分:经末端分析，若该蛋白质具有两条以上肽链，并且肽链之间是通过非共价键连接，使用蛋白质变性剂将其变性后分开；若蛋白质肽链之间通过共价键相连，则可采取过甲酸氧化法或巯基乙醇还原法将其分开。4.各肽链中氨基酸排列次序测定:使用两种以上办法将肽链部分水解成肽段，测各肽段氨基酸次序，然后使用片段重合法推测出完整肽链氨基酸次序。5.确定二硫键和酰胺位置6.确定氨基酸序列 10/10/202315第15页 (四)胰岛素一级构造 1953年英国Sanger等人，完成了牛胰岛素(Isulin)一级构造测定工作，分子量为5700D，有A链(21AA)和B链(30AA)两条肽链，两个链间有二硫键和一种链内二硫键(A链)。10/10/202316第16页 五、 蛋白质构象和维持构象作用力 p40-41构型（configuration):立体异构体分子中取代原子或 基团在空间取向，如几何异构体和旋光异构体。 构型互变需要共价键断裂。构象(conformation)：取代基团当单键旋转时形成不一样 立体构造。 构象有没有数种，交叉型最稳定，重合型最不稳定。