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大鼠冠状动脉心肌缺血模型制作的改进 为了提高实验动物的生存率，现在使用了打开大鼠冠状动脉结石的心肌缺血模型。但是,在呼吸机应用的过程中实验操作过程繁琐,又占用实验台有限的空间,且需要购置呼吸机增加成本。为了克服上述缺点,在没有呼吸机的条件下进行实验,我们对心肌缺血模型的制作方法进行了改进,经过不断的探索,建立了不用呼吸机制作心肌缺血模型的新方法,简化实验操作步骤,减少操作时间,节约空间,并与应用呼吸机制作的模型进行比较。 材料和方法 1 实验动物:scxk Wistar种大鼠,雄性,体重200-220g,30只。中国医学科学院实验动物研究所提供,合格证号:SCXK京2000-0006。分常规组和改进组,每组15只。 2 呼吸及心肌梗死试验 动物模型参照文献制作,常规组:腹腔麻醉(水合氯醛35g·kg-1),仰位固定,心电图机(ECG6511型Cardiofax,上海)以标准Ⅱ导联监测动物心电图;切开气管,插入呼吸管,胸骨左侧断第四五肋开胸,剪开心包,暴露心脏,开胸后接呼吸机(SC型,上海)进行人工呼吸(32次·min-1,呼吸比值1:3),将心脏挤出,于肺动脉圆锥与左心耳之间、左心耳根部下方2～3mm处穿线、结扎冠状动脉左前降支,记录标准Ⅱ导联心电图(无ST段及T波改变者淘汰),关闭胸腔,缝合胸壁,恢复自主呼吸。24h后,心脏结扎线以下横切5片,N-BT染色,采用多媒体彩色病理图文分析系统(MPIAS 500型,北京)以固定取象距离测量正常心肌及梗死心肌面积,观察心肌梗死程度。 改进组:操作方法同常规组,但不用呼吸机,改用手指以中等力度顶心脏靠脊柱侧根部迅速穿线。手术时间由麻醉后固定动物开始至关闭胸腔为止。3统计学处理 实验数据用x±s表示,模型出现率用χ2检验,心肌梗死面积采用t检验。 结果 常规组和改进组动物中,生存率及心肌梗死面积未见明显差异的情况下,改进组手术时间明显减少。结果见表1。 模型制作的改进 在实际的操作中由于实验者或者动物批次的不同生存率会有所变化,本研究在以上相同的情况下,观察麻醉条件下,结扎大鼠冠脉形成的急性心肌梗死实验。结果表明,这种不用呼吸机设备制作的模型与常规组比较,实验动物生存率和实验结果的稳定性无明显差异,而手术时间明显减少。笔者将该模型制作方法应用于观察急性麻醉条件下结扎冠脉形成3h心肌梗死实验以及用于制作结扎大鼠冠脉心肌梗死再灌性3h或24h实验,本研究结果得到重复。本改进的意义在于:①手术时间明显减少,提高了工作效率。②操作者摆脱了呼吸机的束缚,仅仅凭借一把剪刀和两把镊子即可开展实验。 本方法操作时应注意以下2点:①由于没有呼吸机的支持,胸腔打开后必须快速闭合。开胸时间超过10s或更长,模型的成功率会有所降低。实际操作经过科学的设计和训练,10s开胸时间可以保证。我们的方法是,开胸断肋后短暂闭合胸腔,心脏挤出胸腔后,用左手中指以中等力度顶心脏靠脊柱侧根部使左心耳根部下方暴露清晰,利于快速穿线,心脏迅速归位,以保证手术成功。②一般认为不断肋比断一肋对动物的损伤小,断一肋比断两肋损伤小,我们的相关实验结果表明断两肋与不断肋比较,生存率未见明显差异。