红掌愈伤组织诱导的培养条件研究.docxVIP

红掌愈伤组织诱导的培养条件研究 又名红芽花、叶花、鹤嘴和花坛。它们是天南星科多年生草本植物。 红掌花朵独特, 佛焰苞明艳华丽, 色彩丰富, 极富变化, 花期长, 可维持3个月之久, 鲜切花可维持20 d以上, 是当前国际流行的盆花及切花名贵花卉。 红掌的传统繁殖方式有分株繁殖、扦插、播种和组织培养, 唯有组织培养方法可以大量繁殖, 形成工厂化生产, 并保持红掌无性系的优良性状, 为红掌的最佳繁殖方法, 但是影响红掌组织培养的主要因素是愈伤组织的诱导, 我们以红掌优良品种“阿拉巴马”为材料, 对影响红掌愈伤组织培养的因素外植体条件、消毒时间、基本培养基及激素配比等进行研究, 筛选出适合红掌 “阿拉巴马”愈伤组织培养的最佳条件, 为红掌的快速繁殖奠定基础。 1 材料和方法 1.1 试验材料 选择郑州市农林科学研究所智能温室红掌资源圃盆栽的红掌品种“阿拉巴马”, 选取外植体叶片, 用自来水冲洗干净后供消毒用。 1.2 叶片幼嫩程度对愈伤组织诱导率的测定 1.2.1消毒时间对红掌愈伤组织培养的影响将自来水清洗过的红掌幼嫩叶片在无菌超净工作台上用70%的酒精浸泡30 s, 再用无菌水冲洗3遍, 然后用0.1% 的升汞溶液分别消毒3 min、5 min、7 min和9 min, 最后用无菌水冲洗3遍。 接种时切除灭菌剂接触的伤口, 将叶片切成0.5 cm×1.0 cm大小的叶块, 接种在改良MS+6-BA 1.0 mg/L+2.4-D 2.0 mg/L培养基上, 每个组合20个叶块, 每瓶4个叶块, 生长30天, 统计愈伤组织诱导率, 3次重复, 取平均值。 1.2.2叶片幼嫩程度对愈伤组织培养的影响将红掌叶片按照叶片未展开、 叶片刚展开、 叶片展开后1周、成熟叶片等进行消毒处理, 接种在改良MS+6- BA 1.0 mg/L+2.4-D 2.0 mg/L培养基上, 每个组合20个叶块, 每瓶4个叶块, 生长30天, 统计愈伤组织诱导率, 3次重复, 取平均值。 1.2.3基本培养基对愈伤组织培养的影响愈伤组织诱导基本培养基设置为MS、1/2MS、改良MS (KNO3250 mg/L、NH4NO3250 mg/L) 、1/4MS等4种基本培养基, 激素配比为6-BA浓度为1.0 mg/L, 2.4-D浓度为2.0 mg/L, 每个组合20个叶块, 每瓶4个叶块, 生长30天, 统计愈伤组织诱导率, 3次重复, 取平均值。 2 结果与分析 2.1 min时越伤组织诱导率 不同消毒时间对红掌“阿拉巴马”愈伤组织诱导的影响从表1可以看出, 红掌愈伤组织的诱导率随消毒时间的延长先升高后降低, 消毒时间为5 min时愈伤组织诱导率最高为75%;消毒时间3 min时愈伤组织诱导率最低为21.67%, 主要由于消毒时间太短, 污染率较高; 消毒时间9 min时愈伤组织诱导率为28.33%, 主要是消毒时间较高, 叶片褐化严重。 因此, 红掌 “阿拉巴马” 叶片最佳消毒时间为0.1%升汞5 min。 2.2 叶片红掌愈伤组织的诱导率 叶片幼嫩程度对红掌愈伤组织诱导的影响从表2可以看出, 叶片刚展开红掌愈伤组织诱导率最高为71.67%; 叶片未展开红掌愈伤组织诱导率最低为23.33%, 主要因为叶片太嫩, 消毒过程中容易伤害到叶片, 使叶片失去再生能力;成熟叶片红掌愈伤组织诱导率为31.67%, 比叶片刚展开和叶片展开1周的愈伤组织诱导率低, 主要因为成熟叶片细胞老化, 愈伤组织的诱导率较低; 叶片展开1周的愈伤组织诱导率比叶片刚展开稍低。 因此, 幼嫩叶片是红掌叶片愈伤组织诱导的最佳外植体。 2.3 no3离子对红掌愈伤组织诱导率的影响 从表3可以看出, 基本培养基对红掌愈伤组织的影响较大, 在MS培养基上红掌的愈伤组织诱导率最低为53.33%, 在改良MS培养基上愈伤组织的诱导率最高为81.67%, 试验发现随着基本培养基上NO3离子含量越小, 愈伤组织诱导率越高, 说明NO3离子对红掌愈伤组织诱导率影响较大。 2.4 相同6-ba和2.4-d浓度对愈伤组织诱导率的影响 从表4可以看出, 不同激素配比的红掌愈伤组织诱导率的影响较大, 愈伤组织诱导率随6-BA浓度的增大先增高后降低, 在相同6-BA浓度下, 愈伤组织诱导率随2.4-D浓度的增大先升高后降低, 在2.0 mg/L时愈伤组织诱导率最高。 在不同激素配比下, 愈伤组织诱导率最高为83.21%, 最低为22.13%。 因此, 愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+ 6-BA 1.0 mg/L+2.4-D 2.0 mg/L。 3 织诱导培养基 通过本试验我们对红掌“阿拉巴马”愈伤组织诱导影响因素的研究, 筛选出适合红掌“阿拉巴马”愈伤组织诱导的基本培养基为改良MS, 最适采用外植体为刚展开的叶片,