初期稻叶瘟病害的叶绿素荧光光谱分析.docxVIP

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? ? 初期稻叶瘟病害的叶绿素荧光光谱分析 ? ? 周丽娜 程树朝 于海业 张 蕾 (1.吉林大学工程仿生教育部重点实验室, 长春 130025; 2.吉林农业大学工程技术学院, 长春 130118) 初期稻叶瘟病害的叶绿素荧光光谱分析 周丽娜1,2程树朝2于海业1张 蕾1 (1.吉林大学工程仿生教育部重点实验室, 长春 130025; 2.吉林农业大学工程技术学院, 长春 130118) 为了实现稻叶瘟病害的早期、快速检测,对稻叶瘟病害初期水稻叶片的叶绿素荧光光谱变化进行分析,建立光谱诊断模型。将稻梨孢接种于水稻叶片,分别在接种前期(0 h)、潜育期(48 h)和病斑初现期(7 d)3个时段采集水稻叶片的叶绿素荧光光谱。分析3个时段光谱变化特征,并利用Savitzky-Golay平滑(SG)和一阶导数变换(FDT)对光谱进行预处理。利用高斯拟合法(GFF)分别对原始光谱、SG平滑光谱和SG-FDT光谱提取各波段光谱特征向量。将试验样本划分为建模样本和检验样本,以病害初期的3个时段作为稻叶瘟病害的等级指标,分别采用全波段光谱特征向量和组合波段光谱特征向量,对3种预处理光谱利用建模样本建立稻叶瘟病害的支持向量分类(SVC)模型,对比4个经典核函数,并利用检验样本对模型进行检验。结果表明,蓝绿光区域、红光与远红光区域荧光随初期稻叶瘟病害程度的变化而变化,SG-FDT光谱的GFF-SVC(PLOY)模型对3个时段病害的分类准确率最高,且原始光谱、SG光谱、SG-FDT光谱的不同波峰位及其组合对稻叶瘟病害的识别效果不同。 初期稻叶瘟; 高斯拟合; 支持向量分类机; 叶绿素荧光光谱 引言 稻瘟病是世界真菌性病害,为防止其对粮食生产造成重大影响,稻瘟病害的早期、快速检测一直被人们关注。目前,稻瘟病检测方法主要包括两大类:一类是包括PCR法[1]、DNA阵列法[2]等基于分子生物学的检测方法,这些技术虽然检测结果较精确,但通常是在实验室内进行,样本制作复杂,很难满足实时应用的需求;另一类是包括时间序列分析[3]、气象信息分析[4]、菌源信息分析[5]以及光谱分析等的无损检测。虽然气象信息、菌源信息对稻瘟病害的发生和流行具有重要影响,时间序列分析也可依据往年病害情况对稻瘟病害提出预警,但是对于作物生产者而言,最关心的却是作物本身是否已经被病害威胁以及病害可能发生的程度,因此,直接采用各种手段来观测植物的生长状态仍然是评价植物病害最主要的方法。光谱分析法是通过对植物受到病害胁迫时表现出的光谱特异性差异进行分析来实现病害的检测分级,常见的有高光谱成像技术和叶绿素荧光光谱法。杨燕[6]利用高光谱成像技术实现稻瘟病害识别,这是一种利用植物受到病害胁迫时表现出对不同波段光谱反射特征的差异来研究植物生长状态的方法,而植物的叶绿素荧光是植物在吸收光能过程中,除光化学反应及维持机体对热的需求外的非光化学能量耗散部分[7-8]。当植物叶片受到病害威胁时,叶绿素含量及其光合能力会发生改变,能量分配发生改变,具有叶绿素无损“探针”之称的叶绿素荧光光谱也会随之改变[9]。叶绿素荧光作为一种能量的再发射过程,虽然仅占吸收总能量的2%~5%,却足以成为植物在环境中生长状态诊断的依据[10-11]。 近年来,随着叶绿素荧光技术的不断成熟,光谱分析技术的不断完善,叶绿素荧光光谱在植物病害分析方面的应用备受关注。张永江等[12]利用Fraunhofer线原理从冠层反射光谱中成功提取日光诱导荧光信息,可反映田间小麦条锈病的发病情况;黄文江[13]发现随着小麦条锈病的加重,685 nm处的荧光增强,740 nm处反而下降;杨昊谕等[14]利用叶绿素荧光光谱区分了黄瓜霜霉病和蚜虫害。对于稻叶瘟而言,判断病害是否已经发生并进行早期防治是关键,因此,本文旨在利用叶绿素荧光光谱分析初期稻叶瘟病害的发展状态,为初期稻叶瘟病害的识别与诊断提供一种方法。 1 材料与方法 试验于2015年7月在吉林农业大学校园内完成,采用盆栽形式,选择对稻瘟病抗性极低的“蒙古稻”作为试验对象,盆内套袋种植,维持盆内水面高于土壤表面1 cm以上,每盆3穴,共种植20盆。 1.1 稻梨孢接种方法 将稻梨孢进行扩大培养后利用米糠培养基产孢,然后用蒸馏水冲洗得到孢子悬浮液,用喷壶喷洒于处于吐穗扬花期的水稻叶片,并对水稻及花盆进行黑色塑料袋套袋处理,将其置于加湿器旁,温度20~29℃,使孢子完成侵染过程。12 h后退去塑料袋,其它条件不变。 1.2 叶绿素荧光光谱采集 首先对60片水稻叶片旗叶进行标号,因菌丝生长温度范围内,稻叶瘟潜育期为4~7 d,所以分别在接种前期(0 h)、潜育期(接种后48 h)和病斑初现期(接种后7 d)3个时段采集所标记叶片的叶绿素荧光光谱,并最终保留接种7 d后病斑可见的39片叶片3

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