“敏筛”说明书模板.docx

Instruction manual (说明书)： 用途 AllergyScreen 过敏原检测试剂盒 AllergyScreen 过敏原定量检测系统承受免疫印迹方法，定量检测人血清中过敏原特异性 IgE 抗体。 概述 IgE 免疫球蛋白觉察始于 1964 年，它在I 型变态反响发生气制中起重要作用。免疫应答时 B 淋巴细胞分化成熟为浆细胞，并合成和分泌不同类型的抗体。该过程由 Th 和 Ts 细胞调整，假设调整失控，通常不会造成损害的抗原也能激发免疫应答，刺激抗原特异性 B 细胞分化成熟为浆细胞，并产生 IgE 抗体, IgE 抗体通过 Fc 段同嗜碱性粒细胞和肥大细胞外表 Fc 受体结合。当同一变应原再次进入机体，直接作用于 IgE，并通过它的打算簇与 IgE 分子 Fab 段间的结合，形成 IgE 受体聚拢成片,这些变化最终导致嗜碱性粒细胞和肥大细胞脱颗粒释放组胺等生物活性物质，从而产生如麻疹`荨麻疹、皮炎、关节炎，枯草热〔过敏性鼻炎〕` 哮喘及过敏性休克等典型的 I 型变态反响病症。 检测原理 特异性过敏原被吸附于硝酸纤维素膜外表，置于反响槽中。用移液器参与病人血清，室温下孵育，标本中过敏原特异性的IgE 抗体与过敏原发生反响，并连接在硝酸纤维素膜上。将多余的抗体冲洗脱掉，再参与标记了生物素的抗人IgE 抗体，室温下孵育，冲脱未结合上的抗抗体。然后参与结合有碱性磷酸酶标记的链霉亲和素，室温下孵育，链霉亲和素和生物素结合。将未结合上的酶标链霉亲和素冲洗干净。当再参与 BCIP/NBT 酶作用底物并孵育后，碱性磷酸酶发生特定的酶显色反响，试剂条上消灭沉淀。颜色深浅与血清中 sIgE 抗体含量成正比。待试剂条枯燥后，CCD 相机照相，读取检测结果。 检测系统组成 每套检测系统包括： 1×12 检测条：标记有 20 种过敏原的硝酸纤维素膜，置于塑料反响槽中〔混合过敏原组，吸入组，食物组〕 1× 洗脱液：〔TRIS/NaCl，包含 0.1%NaN3〕可稀释成 1x500ml 的清洗液，pH=7.5 〔20ml〕 1× 标记有生物素的 抗人 IgE 抗体〔白盖，多抗 〕，含 0.1%NaN3 1× 酶标链霉亲和素〔红盖〕，连接有碱性磷酸酶的链霉亲和素 1× 底物〔蓝盖〕，BCIP/NBT 12× 加样吸管〔300 微升〕 1× 使用说明书 未供给的试验所需的其他工具 稀释液 蒸馏水或去离子水 其他 搅拌器；量筒〔500 毫升〕，500 毫升洗瓶，具 10 个不同板型的洗板机〔也可无〕，避光的孵育箱〔具体要求见 MEDIWISS 说明书〕；水平混匀器；电吹风 〔也可无〕；专用阅读仪〔RAPID READER〕和电脑〔Windows98，Windows2023 ME 或 Windows2023 PROF 带 USB 接口〕及打印机。 留意事项 本系统用于检测人血清中 sIgE，全部患者血清都可能有传染性，操作时应实行相关防范措施。 由于抗抗体和洗脱液利用叠氮钠防腐，故应避开接触皮肤和粘膜。还应避开与铜或铅的容器接触，以免发生爆炸。 每次试验完毕，检测者应妥当处置各种废物。 全部接触过具潜在传染性的标本的器具，必需经消毒处理或在 120℃高温下处理一小时以上。 不同批号的试剂组分不行互换使用。包装损坏或消灭漏液的试剂，不应 再使用。 贮存条件及有效期 检测条应置于阴凉，枯燥，黑暗的塑料袋中。于 2-8℃下保存，在有效期内使用。留意避开各种污染。稀释过的洗脱液在 2-8℃下至多保存八周。 应避开底物受到链霉亲和素酶标物之污染而导致底物染色，结果错误。此外，底物必需避开阳光照耀，以防分解或自动氧化造成染色。假设底物变色则不应再使用。 试剂稳定性 使用前假设底物混浊变或呈紫色，说明试剂已变质，不能再使用。 标本采集和储存 本系统承受人血清为标本。静脉采血待血清自然析出或离心〔 4000G/ 转〕10 分钟。应避开使用反复冻融及被污染的标本。使用经加热灭活，脂血， 溶血，黄疸及脂浊的血标本会导致结果的不正确。 标本在 2-8℃下保存一周。假设需保存更长时间，应置于-20℃以下贮存。 检测过程 概述 使用前全部试剂及反响槽都应先恢复到室温(20-22℃)。试剂在使用前必需充分混匀。结果的可重复性主要取决于准确的加样，严格地遵守孵育时间`温度和标准性地冲洗检测条。通常底物显色反响时，温度每上升 1℃，反响时间应相应削减 30 秒钟。 试验中应尽量避光，建议遮盖反响槽以避开蒸发损耗。拿反响槽时应避开接 触其外表，而握其手柄。病人资料〔如编号〕可以贴在手柄上。 严格按说明书操作，否则孵育时间和温度的偏差会导致标本的结果错误。 底物孵育必需在暗箱中操作，以免底物自动显色。 严格依据检验室规程工作。 清洗液的制备 将洗脱液置于 500ml 的量筒内，加