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黄芩化学成分研究 黄酮类化合物。有关黄酮类化合物抗凝血,抗血小板聚集的研究报道很多。本实验通过对75%乙醇提取物的氯仿部位萃取物进行化学成分研究,分离得到10个化合物,8个为黄酮类成分(表1),通过波谱数据解析及相关文献对照确定该10个化合物的结构,分别为β-谷甾醇(1),苯甲酸(2),千层纸素-A(3),汉黄芩素(4),黄芩素(5),5,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮(6),黄芩黄酮-Ⅱ(7),6,7,8-三甲氧基-5,2′-二羟基黄酮(8),5-甲氧基-7-羟基二氢黄酮(9),5,7,2′,5′-四羟基-8,6′-二甲氧基黄酮(10)。其中,化合物(9)为在该植物中首次发现(表1)。 1 高效液相色谱试剂 Bruker AR×300核磁共振波谱仪(TMS为内标,瑞士Bruker公司);Waters 515高效液相色谱仪,2996检测器,Empower色谱工作站;Synapt质谱仪(Waters公司);X-4数字显示显微熔点仪(未校正,北京泰克仪器有限公司)。柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂)、GF254薄层硅胶(青岛海洋化工厂)。高效液相色谱所用试剂为色谱纯,其余均为分析纯。 黄芩药材购自安徽丰原铜陵中药饮片有限公司,经南京中医药大学吴德康教授鉴定为黄芩S.baicalensis的干燥根。 2 乙醇-乙酸乙酯-正丁醇萃取 取黄芩干燥根8 kg,粉碎,分别用10,8倍量75%乙醇提取2次,每次2 h。回收乙醇得浸膏。用适量的水溶解浸膏得混悬液,分别用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。取氯仿部位浸膏(400 g),经硅胶柱色谱,石油醚-乙酸乙酯系统洗脱,分离纯化得到10个化合物。 3 鉴定汉麻黄素wolin,效能 化合物1 白色针状结晶(乙酸乙酯)。1H-NMR(CDCl3)δ:5.35(1H,s,br,6-H),3.53(1H,m,H-3)。薄层色谱检识,其Rf值在多个溶剂系统中均与对照品一致。故鉴定该化合物为β-谷甾醇。 化合物2 无色细长针状结晶(乙酸乙酯)。其1H-NMR数据与苯甲酸氢谱数据基本相似,故鉴定为苯甲酸。 化合物3 淡黄色针状结晶(乙酸乙酯)。mp202~204℃。TOF-MS-ES+(m/z):284(M+1)。(DMSO-d6,300 MHz)δ:12.91(1H,s,5-OH),10.78(1H,s,7-OH),8.07(2H,m,H-2′,6′),7.58(3H,m,H-3′,4′,5′),6.95(1H,s,H-3),6.62(1H,s,H-8),3.74(3H,s,OCH3)。13C-NMR参见表2。以上数据与文献报道一致,故鉴定为千层纸素-A(oroxylin-A)。 化合物4 黄色细长针状结晶(乙酸乙酯)。mp205~207℃。TOF-MS-ES+(m/z)284(M+1)。1H-NMR(DMSO-d6,300 MHz)δ12.49(1H,s,5-OH),10.80(1 H,s,7-OH),8.07(2 H,m,H-2′,6′),7.61(3H,m,H-3′,4′,5′),6.32(1H,s,H-6),3.84(3H,s,OCH3)。13C-NMR参见表2。以上数据与文献报道一致,故鉴定为汉黄芩素(wogonin)。 化合物5 鲜黄色细小砂晶(乙酸乙酯)。mp269~271℃。TOF-MS-ES+(m/z)270(M+1)。1H-NMR(DMSO-d6,300 MHz)δ12.67(1H,s,5-OH),10.57(1 H,S,7-OH),8.81(1 H,S,6-OH),8.06(2 H,m,H-2′,6),7.59(3 H,m,H-3′,4′,5′),6.94(1 H,s,H-3),6.63(1 H,s,H-8)。13C-NMR参见表2。以上数据与文献报道一致,故鉴定为黄芩素(baicalein)。 化合物6 浅黄色针状结晶(乙酸乙酯)。mp180~182℃。TOF-MS-ES+(m/z)286(M+1)。1H-NMR(DMSO-d6,300 MHz)δ12.93(1H,s,5-OH),10.71(1 H,s,7-OH),7.52-7.37(5 H,m,H-2′,3′,4′,5′,6′),6.02(1 H,s,H-8),5.57(1 H,dd,J=10.9,2.79),3.18(1 H,dd,J=17.1,10.9),2.82(1 H,dd,J=17.1,2.79),3.68(3 H,s,OCH3)。13C-NMR参见表2。以上数据与文献报道一致,故鉴定为5,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮(dihydroroxylin A)。 化合物7 黄色片状结晶(乙酸乙酯)。mp 174~176℃。TOF-MS-ES+(m/z)374(M+1)。1H-NMR(DMSO-d6,300 MHz)δ12.67(1H