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低有效磷日粮中添加asn1480植酸酶干曲对肉仔鸡生长性能及磷利用的影响 植物中的酸化学名称为六磷酸肌盐（meo-i-osil），这是谷物中磷的主要存在形式，也是饲料中难以使用的磷来源。由于植酸与钙、镁、铁、锌等金属离子及蛋白质有很强的络合作用,所以又是饲料中的抗营养因子。植酸不但降低了动物对这些营养物质的利用率,而且动物粪便中的磷和氮元素对环境也造成了污染。植酸酶(Myo-inositol hexaphosphate phosphohydrotase)即肌醇六磷酸水解酶,可将植酸及其盐类水解为无机磷和肌醇五磷酸盐及肌醇单磷酸盐。在饲料中添加植酸酶,可以降低其抗营养作用,提高植酸磷、蛋白质和矿质元素的利用率。 本试验通过对肉鸡生长情况和磷利用率的测定,研究饲料中添加AsN1980植酸酶干曲后对肉鸡生产性能的影响,现将研究结果报道如下。 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 种植酸酶菌 由本课题试验室采用植酸钙平板分离法分离,经紫外线诱变筛选得到的黑曲霉产植酸酶菌株,暂命名为AsN1980。 1.1.2 测试鸡 取180只一日龄AA肉仔鸡随机分为对照组、试验组,各设1次重复。 1.2 方法 1.2.1 巴氏灭菌法 AsN1980菌株经固体发酵后, 滴加数滴氯仿过夜以促进菌体自溶,经70℃,30 min巴氏灭菌法灭菌,以杀灭营养体,制成干曲。参照张若寒钒钼酸铵法测经各灭菌温度后AsN1980植酸酶干曲的酶活性。酶活性的定义:在37℃,pH 5.5的条件下,1 h内从0.005 1 mol/L的植酸钠溶液中释放出1 mg无机磷所需要的植酸酶量为1 U。 1.2.2 黄豆粕、菜籽粕、磷酸氢钙的含量 试验鸡饲喂添加少量磷酸氢钙的低有效磷日粮。其组成为玉米72.5%,麦麸12.5%,黄豆粉10.0%,菜籽粕4.5%,磷酸氢钙0.5%。在试验组日粮中添加AsN1980植酸酶干曲,在对照组日粮中添加高温高压条件下(121℃,1.0×105Pa,30 min)失活的AsN1980植酸酶干曲。 1.2.3 生产性能测定 试验期从2003年4月20日至2003年5月20日。试验地点为西南农业大学农学与生命科学学院植物生理生化实验室。自4月20日开始,每隔10日测量1次各项生产性能。5月20日进行粪便采样,于70℃烘干1 h后待测。自由采食,自由饮水,鸡饲养于全封闭鸡舍内。 1.2.4 预饲料阶段 为了使鸡适应试验日粮,从而使试验结果更具准确性。从4月17日至4月20日为预试期。 预试期日粮按照试验日粮的组成配制。 1.2.5 利用直线回归方程计算磷 参照刘朝霞微波消解法消化粪便及饲料中磷,在660 nm波长下测消光值(A),对所得数据进行假设测验,以检验是否存在直线回归(P0.05)。若存在直线回归,则作出直线回归方程。将样品总磷消光值分别代入直线回归方程算得磷浓度,进而算得粪便及饲料中磷含量。经t测验(t=14.354,tt0.05,6)所测得的消光值与磷标液浓度存在直线回归关系(P0.05),回归方程为:Y=0.023 8X-0.063 0。 2 结果与分析 2.1 性的影响因素 AsN1980植酸酶干曲酶活性为5.21 μ/g。 灭菌温度对植酸酶活性的影响见表1。 由表1可知,60℃以下的温度对AsN1980植酸酶干曲酶活性几乎不造成影响。60~70℃温度只对酶活性造成轻微影响,70℃以上温度对酶活性影响较大,121℃以上AsN1980植酸酶干曲酶则全部失活。 2.2 两组t测验单尾的指标比较 AsN1980植酸酶干曲对肉鸡生产性能的影响见表2。 分别对不同日龄的肉仔鸡生产性能指标进行t测验(单尾),检测试验组与对照组的各项指标是否存在显著差异(P0.05)。经测验试验组与对照组在各个生长阶段的料肉比存在显著差异(P0.05),料肉比减少0.233~0.256,优于对照组。试验组与对照组在各个生长阶段的成活率差异不显著。 2.3 两组肉仔鸡粪磷指标t测验单尾的比较 AsN1980植酸酶干曲对肉鸡磷利用率的影响见表3。 分别对不同日龄的肉仔鸡粪磷指标进行t测验(单尾),检测试验组与对照组的各项指标是否存在显著差异。经测验试验组与对照组在各个生长阶段的磷利用率存在显著差异(P0.05),植酸磷的利用率提高7.63%~8.27%,优于对照组。 3 不同给药剂量对成活率的影响 试验组与对照组在各个生长阶段的料肉比、磷利用率上存在显著差异,说明AsN1980植酸酶具有有效性。试验组与对照组在各个生长阶段的成活率差异不显著,说明AsN1980植酸酶具有安全性。 在饲料中添加700 U/kg AsN1980植酸酶可以对肉仔鸡的生长起明显的促进作用,并能有效地提高饲料中植酸磷的吸收,降低粪磷的排放量,从而减轻对环境的磷污染。AsN1980植酸酶是一