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尾叶桉叶片化感作用研究 许多桉树的引进和种植，尤其是单株栽培，不仅给人类带来了显著的经济效益，而且对当地生态环境造成了一定程度的破坏。关于桉树人工林对本土生物区系的影响,有研究证明是桉树向环境中释放的水溶性和挥发性物质的化感作用所造成。 从营造生态公益林的角度出发,有必要对桉树纯林进行逐步改造。在我国,桉树与相思等豆科植物混交是常用的栽培模式,但对混交林的研究目前仍停留于对其宏观效益的分析方面,而缺乏对其化感作用的探讨。 台湾相思(Acacia confusa)、大叶相思(Acacia auriculaeformis)、马占相思(Acacia mangium)和南洋楹(Albizia falcataria)等豆科植物均具有根瘤,可起固氮作用,改善土壤养分(广东省林业局,2005),在一定程度上排除了桉树竞争效应的影响。而且,这4种植物的适应性较强,均可考虑作为桉树的理想伴生树种。因此,本研究选取这4种豆科植物作为受体,并选取尾叶桉(Eucalyptus urophylla)作为供体,开展其叶片自然挥发物和叶片水抽提物化感作用的生物测定,以选出较为合适的混交树种,为合理设计桉树栽培模式提供理论依据,避免大面积营造桉树纯林产生的不良后果。 1 材料和方法 1.1 水吾山森林公园 作为供体的尾叶桉新鲜叶片采自隶属于广东省东莞植物园的水濂山森林公园,而作为受体的台湾相思、大叶相思、马占相思、南洋楹种子均购自广东省林业局种子销售部。 1.2 实验方法 1.2.1 种子的吸水、割痕 播种前,将台湾相思用沸水烫种不超过1 min,南洋楹、大叶相思和马占相思均用10倍于种子的80 ℃热水浸泡,待热水自然冷却至室温后将4种豆科植物种子用清水漂洗2~3次,再加入浓度为w=0.5%的过氧化氢溶液,室温浸种24 h催芽。对于吸水效果较差的部分种子,则避开胚轴和胚根的部位用刀刻法在种壳上割痕。后用w=0.1%高锰酸钾溶液浸泡不超过30 min。接着用清水漂洗2~3次后,挑取粒大饱满的种子作为实验培养对象。 1.2.2 种子萌发与幼苗生长 分别将400 g新鲜尾叶桉树叶置于硫酸干燥器(高40 cm,直径30 cm)底部的干燥室,对照的底部为空白。在干燥器上部的贮藏室进行种子萌发与幼苗生长试验。在直径为15 cm的培养皿中铺放两层滤纸,加蒸馏水饱和湿润,每皿均匀摆放50粒种子,不加盖,每处理3次重复。室温20~25 ℃培养,及时补充蒸馏水。8~10 d后记录种子发芽率以及幼苗根长、茎高。 1.2.3 浸提液及样品处理 取新鲜、健康的尾叶桉树叶,洗净剪碎后加入5倍于材料鲜质量的清水,室温浸提24 h,然后用滤纸过滤得水抽提物。 在直径为15 cm的培养皿中铺放两层滤纸,从饱满的受体种子中分别选取50粒均匀摆放于滤纸上,分别加入水抽提物15 mL,以蒸馏水作对照,每处理3次重复。盖上培养皿盖,置于温度为28 ℃相对湿度为60%的人工气候培养箱,12 h黑暗、12 h光照交替培养,及时补充浸提液或蒸馏水。8~10 d后记录种子发芽率及幼苗根长、茎高。 1.2.4 缩液的科学处理 取新鲜、健康、干净的尾叶桉树叶,剪碎后加入相当于材料鲜质量5倍的清水,在室温下浸提3次,每次24 h。合并3次抽提物,减压抽滤,在60 ℃水浴条件下减压蒸馏浓缩。将浓缩液配成质量浓度为1 g/mL的抽提物,测定时将浓缩液分别稀释成0.2,0.1,0.05,0.02,0.01,0.005,0.001 g/mL等7个质量浓度。 在直径为12 cm的培养皿中铺放两层滤纸,从饱满的受体种子中分别选取30粒均匀摆放于滤纸上,分别加入不同质量浓度水抽提物10 mL,并以蒸馏水作对照,每处理3次重复。盖上培养皿盖,置于温度为28 ℃相对湿度为60%的人工气候培养箱中,12 h黑暗、12 h光照交替培养,并及时补充浸提液或蒸馏水。8~10 d后记录种子发芽率以及幼苗根长、茎高。 1.2.5 t检验与t敏感试验 采用SPSS 13.0统计分析软件对测定指标进行t检验,确定处理与对照间的差异显著性,并比较不同受测指标对处理的敏感性。采用SigmaPlot 8.0和SmartDraw软件对统计结果作图。 2 结果与分析 2.1 台湾研磨、大叶不同处理、不同种子发芽率的比较 尾叶桉叶片自然挥发物对4种豆科植物种子萌发和幼苗生长的影响见图1,大叶相思和马占相思的根长分别比对照高出34.03%和67.24%(P0.01),尾叶桉叶片自然挥发物极为显著地促进了这两种植物的根生长,而对台湾相思和南洋楹的根长则有轻微抑制,但与对照相比无显著性差异。 从茎长来看,台湾相思和南洋楹的此项测试指标分别比对照低了45.48%和34.17%(P0.01),叶片自然挥发物极为显著地抑制了这两种植物的茎生长,而对大叶相思和马占相思的