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不同产地红茶中主要多酚类物质的比较 红茶是世界上最大的茶类之一，也是世界上最高产的茶类。红茶属全发酵茶,其品质特征的形成取决于鲜叶原料所含化合物的种类,其中对红茶风味影响最为重要的是茶多酚,尤其是儿茶素类、黄酮醇类化合物。 茶多酚类在茶叶中的含量及其保健功效已有文献报道,卢邦俊等研究表明:六大茶类中的杨梅素含量均较低,乌龙茶的黄酮醇含量较高。Alessandra等研究表明多酚儿茶素有抗氧化、抗增殖、血管生成和凋亡的影响。Noura Al Gamdi等采用HPLC-PDA-MS2法识别酚和多酚类化合物,研究发现20个化合物包括黄酮及其苷类、酚酸及绿原酸等,黄酮类化合物主要成分为犀草素,芹菜素和香叶木素缀合物。Tzong-Der Way等研究结果表明,红茶茶多酚可能对激素依赖性乳腺肿瘤的化学预防有益。ZenonApostolides等研究结果表明红茶茶多酚的抑制突变作用比绿茶的更有效,红茶保健功能与之前绿茶的相类似。 目前,茶学研究者对茶叶中儿茶素类化合物含量的研究不少,但是红茶中的黄酮醇类和酚酸类物质缺乏系统研究。本试验利用高效液相色谱法(HPLC)对我国具有代表性的15个工夫红茶和正山小种红茶中主要茶多酚类化合物进行系统分析,比较不同产地间红茶主要茶多酚类化合物含量差异,以期为茶叶功能成分以及红茶品质化学研究提供参考。 1 药物、试剂与标准品 供试茶样为全国主要工夫红茶和小种红茶(共16个),由福建元泰茶业有限公司提供,供试红茶样品产地如表1所示。 乙腈(HPLC)、甲醇(HPLC),购自德国Merck公司;冰醋酸(A.R.),盐酸(A.R.),乙二胺四乙酸(A.R.),抗坏血酸 (A.R.),购自国药集团(上海)化学试剂公司;重蒸水;儿茶素标准样品(C、L-EC、EGC、EGCG、ECG、EGCG),规格20mg,纯度 99%,购自上海融禾医药科技有限公司;黄酮醇标准品(杨梅素、槲皮素、芹菜素),规格20mg,纯度 99%,购自四川成都曼斯特科技有限公司。 1.2.2 色谱柱及色谱柱 Agilent1200高效液相色谱 -- 二极管阵列检测器 ( 美国安捷伦科技 );Zorbax Ecllpse XDB-18色谱柱,规格:4.6×250mm,5μm( 美国安捷伦科技 );Sartorius电子分析天平(瑞士赛多利斯 );恒温水浴锅(中国);Thermo Primo R离心机(美国赛默飞世尔科技公司)。 红茶样品经粉碎机粉碎后,过40目筛后,参照GB/叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法中6.3.2.1方法制备测试液。 (2) %乙醇水解法 移取1.2.3样品测试液制备方法中中制备的母液5.00m L,加入2.0 mol/L盐酸5.00m L,置90℃水浴锅水解1h,冰水浴冷却至室温,以甲醇定容至10m L,过0.22μm膜,待测。 (3) 茶多酚和儿茶素类含量检测方法 以GB/T8313-2008茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法中5.7稳定溶液溶解并稀释后配制混合标准品溶液,混标中各标准品浓度如表2所示。 (4) 流动相a/流动相b色谱 流动相,参照GB/T8313-2008茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法中5.8分别制备流动相A、流动相B;泵流速设定为1.00m L/min,梯度洗脱程序如表3所示。 液相色谱二极管阵列检测器光谱的扫描范围278 ~ 370nm,柱温35℃,进样量为10μL。各标准品采集波长如表4所示。 1.2.4 hplc-混合标准样品的色度图 混合标准样品的HPLC色谱图分别如图1。 1.2.5 黄酮醇糖苷类物质的测定 儿茶素类及黄酮醇计算:根据各标准物质色谱峰的峰面积和其相应的浓度绘制各标准物质的校正曲线,样品测试液以峰面积定量; 各黄酮醇糖苷类物质 = 水解液中黄酮醇含量 - 测试液中黄酮醇含量。 试验数据运用EXCEL2003和DPS7.05软件进行统计分析。 2 结果与分析 2.11 不同油茶中酯型儿茶素类物质含量的比较 本试验中,通过对红茶中儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)及表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的分析,结果表明(表5):儿茶素的总量范围是4.50 ~ 41.65mg/g之间,均值为17.30mg/g。儿茶素类物质与没食子酸含量测定代表性的HPLC色谱图如图4、图5。 儿茶素含量在不同红茶样品间差异较大,特别是儿茶素单体与表儿茶素。在儿茶素组成的配比中,台湾红茶的表没食子儿茶素(EGC)的含量1.53mg/g最高,其次是英德红茶、宁红工夫、 苏红工夫、湘红工夫、海南工夫及越红工夫,且它们之间相差不大,含量最低的是政和工夫,为0.20mg/g,是台湾红茶的1/7 ;海