血红蛋白na检测实验室清洁消毒效果监控.docxVIP

血红蛋白na检测实验室清洁消毒效果监控 血液中核酸检测（nat）是要求特殊安全要求的工作场所。极微量的污染即可导致假阳性结果。为保障核酸实验室工作人员的人身安全以及保证核酸检测的准确性,如何有效防止实验室的污染,是NAT实验室面临的首要问题。因此,核酸检测实验室的清洁消毒程序、工作人员对程序的严格执行以及执行后对消毒效果的监控,是核酸检测实验室安全体系得以保证的基础。为评价本实验室的清洁消毒的效果,分析存在问题,确保实验室的环境满足核酸检测工作的要求,本中心自核酸检测实验室开始运营以来,在严格执行实验室清洁消毒标准操作规程的基础上,开始定期对实验室的环境实施监测,对监测结果进行分析。意在对实验室的清洁消毒过程实施控制,及时发现、消除安全风险点,确保核酸检测过程的安全。 1 材料和方法 1.1 监测对象 仪器设备、空气、地面、物体表面。 1.2 检测试剂和试剂 消毒物品:84消毒液、75%的酒精、紫外灯、一次性纱布、核酸检测实验室专用清洁用具;检测试剂: 靶标捕获试剂TCR 扩增试剂(A) 酶试剂(E) 检测探针试剂(P)选择试剂(S);检测设备:System 全自动核酸检测分析系统(美国诺华公司)。 1.3 实验室消毒后检测 根据“医院室内空气消毒”和“医院各种物体表面的消毒”方法,工作前和工作后对实验室物表、地面、环境和仪器设备实施消毒。工作前消毒后1 h采集消毒检测标本。对采集后的标本进行核酸检测,并分析检测结果。另外,结合实验室质控结果及NAT单阳性结果,分析假阳性率。具体方法包括: 1.4 消毒和逻辑检测 紫外线照射,10%次氯酸钠溶液浸泡或擦拭,75%酒精喷洒、1 mol/L HCl溶液擦拭等。本实验室采用每天工作开始前及全部工作结束后用10%的84消毒液擦拭地面、工作台面、仪器及物品表面, 75%酒精向空气喷洒。工作结束后,用紫外灯照射进行空气消毒。紫外灯要求在电压为220 V、环境相对湿度为60%、温度为20～25℃时,辐射的253.7 nm紫外线强度(使用中的强度)不得低于70 μW/cm2,消毒时间不低于2 h。 1.5 试剂准备区和标本间交叉污染 扩增片段的污染(产物污染);天然基因组DNA的污染、试剂污染(贮存液或工作液、阳性对照)以及标本间交叉污染(如气溶胶从一个阳性标本扩散到原本阴性的标本)。根据本实验室的空间布局及核酸扩增实验室可能出现污染的特点,试剂准备区设置2个取样点;标本准备区设置3个取样点;扩增及产物分析区设置4点取样点,见表1。 1.6 核酸检测方法 在工作前消毒处理后进行取样。采集的标本以HBVDNA为参照物,进行核酸检测。1) 空气下落法取样:在每个取样点放置3个样品管,每管4 ml生理盐水暴露放置1 h后,进行核酸检测。2) 物体表面擦拭法取样:用5 cm×5 cm标准涂擦法。用浸有生理盐水的棉拭子按照上述标准横竖往返均匀涂擦5次,并随之转动棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子放入无菌的4 ml生理盐水试管内浸泡30 min后弃棉拭子,对棉拭子浸泡液进行核酸检测。 1.7 消毒监测结果的稳定性分析 分析每月实验室质控品和标准品结果和有效列表率,并统计分析NAT单阳性结果中,鉴别未出现反应性的占当月标本总数的百分率,综合评价消毒监测结果与实验有效列表率、NAT单阳率的相关性。 2 结果 2.1 次监控合格率比较 常规检测使用后,每月进行1次NAT实验室清洁消毒监控,共11次。试剂准备间、标本准备间、扩增产物分析区内的物体表面、仪器表面等及空气 的11 次监控合格率为100%。但4台TIGRIS系统工作站扩增仓内的出风口(KC) 分别有3次在不同月份监控结果中呈现为NAT反应性。第1次为4月份,分别在2台TIGRIS工作站出风口清洁消毒监控结果出现NAT反应性,采用重新取样、增加取样点及取样次数等方法排除假阳性情况,该月清洁消毒监控合格率为95.5%;第2次为9月份,一台TIGRIS工作站出风口清洁消毒监控结果出现NAT反应性,该月清洁消毒监控合格率为97.9% 。 2.2 出现非反应性 扩增检测区域的出风口3个点(KT-1、KT-2、KT-3),左右试剂分配臂各一点(KT-4、KT-5),标本仓的标本传送带(KC1)及自检液1,2漏液接板(KC2)各一点。连续3 d取样3次,监测结果均为NAT非反应性。说明实验室未出现污染,跟进消毒措施有效(表2)。 2.3 清洁消毒效果与nat反应性的关系 由实验环境及试验过程中产生的气溶胶所造成的工作列表无效率为零,每月实验室质控品和标准品有效率为100%。NAT检测单阳性结果中,其中鉴别结果阴性的占总标本数的比率(简称NAT单阳性率,NAT鉴别结果阳性的单阳性标本为真阳性)。但比较清洁消毒效果监控合格率与NAT单阳性率(表2,3):监测T