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5种杀菌剂对辣椒炭疽病的室内毒力试验

青椒是茄子科的一种一级植物。它是广西最重要的蔬菜种类之一，主要分布在南宁附近。每年种植面积约6.67万公顷，年产量20多公里。特别是冬季品种的青椒，已成为一些地方特色农业和促进农民增收的有效手段之一。辣椒炭疽病(Colletotrichumcapsici)是辣椒常发的一种真菌性病害,多发生在叶片和果实上,叶片受害症状:病斑初为褪绿水渍状斑点,逐渐变为褐色,病斑近圆形而中间为淡灰色,果实受害病斑呈褐色,水渍状近圆形或不规则形,有稍隆起的同心环斑纹;果实被害后易干缩。

近年来,随着辣椒种植面积的逐年扩大,引进的品种逐年增多,加上长期连作,使得辣椒炭疽病发病面积不断扩大,导致属于次要病害的炭疽病上升为主要病害,造成辣椒减产,给生产带来巨大损失。为了更加科学有效地防治辣椒炭疽病,寻找出适合当地无公害蔬菜生产中防治辣椒炭疽病的理想药剂,试验选择了5种常用杀菌剂,在室内对辣椒炭疽病菌进行了毒力测定,以期为控制辣椒炭疽病的流行、保障辣椒产业的持续发展提供科学依据。

1材料和方法

1.1试验材料

1.1.1黑色炭疽病原菌分离、纯化和培养方法

炭疽菌分离自广西南宁吴圩镇辣椒果实上呈典型症状的炭疽病斑,按常规组织分离法分离、纯化培养、保存,鉴定该病原菌为黑色炭疽病菌(ColletotrichumnigrumEL.etHalst)。试验前将菌种转接于PDA培养基上扩大培养,培养温度为26～27℃,培养5d左右。

1.1.2pda培训

去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、蒸馏水1000mL。

1.1.3试验剂及其使用浓度

供试药剂根据商品使用说明中推荐的使用范围为参考值,每药剂设定5个质量浓度,见表1。

1.2测试方法

1.2.1马铃薯的制备

(1)PDA培养基:将洗净去皮的200g马铃薯切小块,加水1000mL,煮沸0.5h,用纱布滤去马铃薯,然后加琼脂20g和葡萄糖20g,加热使琼脂完全熔化,加水补足至1000mL,最后分装在三角瓶中,加棉塞后灭菌。(2)含药平板培养基:将表1中不同药剂分别用无菌水配制成所需各浓度的10倍,用移液枪取1mL注入经消毒灭菌的培养皿中,同时倒入9mL冷却至约50℃的PDA培养基,轻轻摇匀,制成含毒平板培养基。

1.2.2细菌生长、抑菌率测定及毒力回归方程

采用含毒介质生长速率法。用直径为6mm的打孔器,在试验前已经活化培养好的炭疽菌菌落边缘菌丝生长旺的地方,打取直径为6mm的菌碟,将菌碟接入经不同药剂处理的含毒平板培养基中,使菌丝生长的一面接触培养基,不同药剂浓度重复3次,倒置于27℃、相对湿度为70%条件下的光照培养箱中培养,5d后用十字交叉法测量菌落生长直径(mm),并计算每个处理菌落的平均值及抑菌率,公式如下:

抑菌率=(对照菌落直径?6)?(处理菌落直径?6)对照菌落直径?6×100%=(对照菌落直径-6)-(处理菌落直径-6)对照菌落直径-6×100%

将菌丝生长抑制率换算成概率值(y),杀菌剂质量浓度(mg/L)转换成以10为底的对数值(x),以抑菌概率值为纵坐标,以浓度对数为横坐标,作毒力回归直线,求出毒力回归方程(y=ax+b)、相关系数(r)和抑制有效中浓度(EC50),以表示杀菌剂对辣椒炭疽病菌抑制作用的强弱。数据的整理应用Excel软件,毒力回归方程、EC50值和相关系数r由DPS数据处理系统分析所得。

毒力回归方程能有效地反映该药剂质量浓度与抑菌效果的关系,EC50即抑制或杀死50%的目标菌所需要的杀菌剂浓度,是衡量杀菌剂毒力最可靠的标准,用EC50值可以对不同种类的杀菌剂毒力大小进行互相比较。

2结果与分析

2.1不同药剂对抗菌性能的影响

从试验结果(表2)可看出,5种不同杀菌剂在设定的质量浓度范围内,辣椒炭疽病菌丝的生长均受到不同程度的抑制。从菌落直径大小看,随着各种杀菌剂浓度增加,菌落直径随之减小,对病菌抑制增大,药剂浓度与抑制率成正相关。在不含药剂培养基上菌落直径达41.0mm,在5种药剂中,70%甲基硫菌灵可湿性粉剂及25%溴菌腈可湿性粉剂在较低质量浓度时就表现出较高的抑制率,25%溴菌腈可湿性粉剂质量浓度为500mg/L时,病菌生长完全受到抑制;80%代森锰锌可湿性粉剂、80%克菌丹水分散颗粒剂在高浓度时才表现较高的抑菌率;而75%百菌腈可湿性粉剂最高浓度抑菌率仅为54.29%。

2.2%溴菌腈可湿性粉体

由表3可见,5种杀菌剂对辣椒炭疽病菌菌丝生长的抑制效果不同。从