二甲双胍通过调节微环境巨噬细胞和成纤维细胞改善深II度烧伤创面愈合质量的机制研究.pdf

摘要

摘要

研究背景：

创面愈合是人体中最复杂过程之一。当皮肤受到深度损伤后，表皮、真皮

及皮下脂肪内多种类型细胞需要进行精确协调，以实现愈合。创面的止血、炎

症、血管生成、生长、重新上皮化和重塑是按时间顺序发生的，但也是重叠的。

巨噬细胞和成纤维细胞贯穿创面愈合始终，起举足轻重的作用。

II

深度烧伤创面在愈合过程中，由于持续性的炎症和异常的纤维化，极易

导致瘢痕产生，无论对患者功能还是外观都产生深远影响。如何能在不影响深

II度创面愈合情况下，早期应用药物减少瘢痕形成，目前研究尚少，缺少相关药

物的治疗。

二甲双胍（Metformin）一直是作为糖尿病治疗的首选药物。作为经典的腺

AMPK

苷酸活化蛋白激酶（）激活剂，近年来越来越多学者发现二甲双胍不仅能

降低血糖，而且在抗肿瘤、抗炎、延缓衰老、抗纤维化等方面具有一定功效。

由于二甲双胍已被证实具有抗炎、抑制纤维化作用，将其应用于深II度烧伤创

面，能否调节创面微环境炎症及纤维化水平，进而改善创面愈合质量，减少瘢

II

痕形成，目前尚未有类似研究。本课题旨在研究二甲双胍干预对深度烧伤创

面愈合的影响，初步阐明二甲双胍调控巨噬细胞和成纤维细胞在炎症和纤维化

的分子机制，具有向临床应用快速转化的重大意义。

II

因此，我们首先体内实验观察二甲双胍干预对大鼠深度烧伤创面细胞外

基质（ECM）主要成分：I型胶原（CollagenI）、III型胶原（CollagenIII）、

Fibronectin

纤连蛋白（）及炎症因子与趋化因子表达量的影响，然后通过体外实

验观察二甲双胍对巨噬细胞和成纤维细胞生物学行为的影响，进一步拟以NF-κB

和AMPK/mTOR、TGF-β1/Smad3信号通路为主要线索探究其分子机制，最后

将巨噬细胞、成纤维细胞共培养，体外模拟炎症微环境，探究二甲双胍在炎症

微环境中的调控作用。通过本研究，从动物和细胞水平初步探究二甲双胍在改

善深II度烧伤创面愈合质量的调节机制，并为其改善深II度烧伤创面愈合质量

提供一种新的途径和思路。

II

摘要

第一部分二甲双胍对大鼠深II度烧伤创面愈合的影响

目的：

III

探讨二甲双胍对大鼠深度烧伤创面的型胶原沉积、炎性因子与趋化因

子的影响。

方法：

1SDII6

、构建大鼠深度烧伤模型只。取自身做对照，烧伤后即刻在烧伤

创面皮下注射不同浓度（1mM,10mM,100mM）二甲双胍1ml。实验分五组（阴

Met0mMMet1mM

性对照组（正常皮肤）、阳性对照组（）、低剂量组（）、中

Met10mMMet100mM

剂量组（）、高剂量组（））。造模成功后，立即注射二

甲双胍，隔天注射持续一周，随后一周不继续干预，14d后提取烧伤创面组织。

HEMassonCollagenIWestern

染色测量烧伤后创面真皮厚度，染色观察创面沉积。

blot检测创面CollagenI