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基因组学与应用生物学
GenomicsandAppliedBiology
ISSN1674-568X,CN45-1369/Q
《基因组学与应用生物学》网络首发论文
题目:砂藓总蛋白质提取方法的选取及双向电泳体系的建立
作者:沙伟,李雯煜,张丽丽,张梅娟,马天意
网络首发日期:2019-03-19
引用格式:沙伟,李雯煜,张丽丽,张梅娟,马天意.砂藓总蛋白质提取方法的选取及
双向电泳体系的建立[J/OL].基因组学与应用生物学.
/kcms/detail/45.1369.Q1415.003.html
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网络首发时间:2019-03-1916:04:19
网络首发地址:/kcms/detail/45.1369.Q1415.003.html
研究报告
ResearchReport
砂藓总蛋白质提取方法的选取及双向电泳体系的建立
沙伟1,2李雯煜1,2张丽丽1,2张梅娟1,2马天意1,2*
1齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,齐齐哈尔,161006;2齐齐哈尔大学,抗性基因工程与寒地生物多样性保护黑龙江重点
实验室,齐齐哈尔,161006
*通信作者,tyma8902@
摘要为进行砂藓(Racomitriumcanescens)蛋白质组学的双向电泳工作,首要前提是获得质量较好的砂藓
总蛋白质,并建立一套完整高效的适用于砂藓的双向电泳体系。本研究以砂藓为研究对象,比较了Tris-
酚抽提法、TCA-丙酮法和试剂盒法3种蛋白质提取方法获得砂藓总蛋白质的浓度和完整性,并对砂藓中蛋
白质双向电泳的运行条件进行了优化和比较。结果表明:3种砂藓总蛋白质提取方法中,Tris-酚抽提法获
得的砂藓总蛋白质浓度最高,SDS电泳结果中条带清晰且较完整,双向电泳后获得的蛋白质点最多,
是3种方法中提取砂藓蛋白质浓度最高完整性最好的方法;基于Tris-酚抽提法的基础上进一步对砂藓总蛋
白质双向电泳体系进行优化,结果显示:利用pH范围为pH4~pH7的IPG胶条,蛋白上样量为1000μg
的条件下,获得的砂藓蛋白质双向电泳图谱蛋白质点最多,图谱中可分辨的蛋白质点共(872±15)个,且低
丰度蛋白质点清晰。本研究筛选出的方法获得了蛋白质点分布均匀、背景清晰、分辨率高、质量较高的双
向电泳图像,建立了砂藓蛋白质组学研究体系的较好方法。本研究结果为砂藓蛋白质组学研究奠定了良好
基础。
关键词砂藓(Racomit
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