食品加工环境浮游菌的测试方法.docxVIP

食品加工环境（洁净区）浮游菌的测定方法

1范围

本标准规定了食品检测和食品加工环境（洁净区）中浮游菌测试条件、测试方法。

本标准适用于食品检测机构和食品生产企业洁净室、洁净区以及局部空气清洁作业区(包括洁净工

作台)的浮游菌的测试和环境的验证。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T16293医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法

3术语和定义

3.1菌落

微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称CFU，通常用个数表示。

3.2浮游菌

悬浮在空气中的活微生物粒子通过浮游菌采样器收集到专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到

可见的菌落数。

3.3浮游菌浓度

单位体积空气中含浮游菌菌落数的多少，以计数浓度表示，单位是个/m3或个/L。

4测试方法

4.1测试原理

本方法采用计数浓度法，选择合适的培养基（能证实其能够支持微生物生长的培养基）、恒温培养

箱，采用浮游菌采样器将收集到的细小空气流直接撞击到平板培养基表面上，附着的活微生物粒子经若

干时间和适宜的生长条件让其繁殖形成菌落，根据浮游菌浓度以判定测试环境是否达到相应洁净度级别

浮游菌的技术要求。

4.2人员职责及培训

洁净室(区)的测试人员应进行本专业的培训并获得相应资格后才能履行对洁净室(区)测试的职责，

其中包含涉及的卫生知识和基本微生物知识。

洁净室(区)的测试人员应选择与测试环境的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式，外面的衣服不

能带进100000级以上的区域。

4.3仪器设备与培养基

4.3.1浮游菌采样器

4.3.1.1原理：浮游菌采样器一般采用撞击法机理可分为狭缝式采样器、离心式或针孔式采样器。视情况自行选择合适的设备。狭缝式采样器由内部风机将气流吸入，通过采样器的狭缝式平板，将采集的空气喷射并撞击到缓慢旋转的平板培养基表面上，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。离心式采样器由于内部风机的高速旋转，气流从采样器前部吸入从后部流出，在离心力的作用下，空气中的活微生物粒子有足够的时间撞击到专用的固形培养条上，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。针孔式采样器是气流通过一个金属盖吸入，盖子上是密集的经过机械加工的特制小孔，通过风机将收集到的细小的空气流直接撞击到平板培养基表面上，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。

4.3.1.2应根据实际需要选择合适的浮游菌采样器。

4.3.1.3浮游菌采样器必须要有流量计和定时器。

4.3.1.4应严格按仪器说明书的要求进行操作。

4.3.1.5采样器必须按仪器的检定周期，定期对仪器作检定，以保证测试数据的可靠性。

4.3.1.6仪器开机，预热至稳定后，方可按仪器说明书的规定对仪器进行校正，同时检查采样流量，并根据采样量设定采样时间。

4.3.1.7采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造，采样管严禁渗漏，内壁应光滑，采样管的长度应根据测定点的高度定，尽量减少弯曲。

4.3.2培养皿

一般采用φ90mm×15mm规格的培养皿。

4.3.3恒温培养箱

必须定期对培养箱进行校准。

4.3.4培养基

大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）或平板计数琼脂培养基（PCA），配制方法见附录A或选择商品化培

养基。

4.3.5高压蒸汽灭菌器

4.4测试步骤

4.4.1采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服进入测试区域，双手用75%酒精消毒或戴无菌手套

操作。

4.4.2采样前，采样器、培养皿表面先用75%酒精严格消毒。

4.4.3用75%酒精清洗采样器的顶盖、转盘以及罩子的内外面，用75%酒精棉球擦拭采样头及采样头的内外壁，同时采用火焰喷枪灼烧采样头及其内壁进行高温灭菌。

4.4.4开启浮游菌采样器，使仪器中残余的酒精蒸发，将消毒好的培养皿置于设备固定位置，旋上采

样头。

4.4.5根据不同的洁净度级别选择合适的采样量，设定好采样时间，置采样口于采样点后，启动测试按钮进行采样。

4.5培养

全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中于36±1℃培养48h。每批培养基应有对照试验，检

验培养基本身是否污染。可每批选定1只培养皿作对照培养。

4.6菌落计数

4.6.1用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计，必要时用5～10倍放大镜检查，有无遗漏。

4.6.2若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。

4.7注意事项

4