LncRNA+CACF调控自噬促进猪心肌梗死后血管再生的机制.pdf

摘要

生猪养殖过程中，多种疾病均可直接或间接导致猪心肌梗死（Myocardial

infarction，MI）的发生，且猪MI临床症状表现晚，死亡快，导致心肌梗死猪只经常

因未接受治疗而死亡，严重影响经济效益。目前研究认为，MI后细胞自噬通过调控

生长因子促进血管内皮细胞增殖和血管成型，促进血管新生，改善MI后的心脏功能

恢复。有研究表明lncRNAs参与MI后的血管再生，改善心脏功能，但其具体机制还

不清楚。

前期，团队基于小型猪MI模型，通过RNA高通量测序筛选出与MI相关的

lncRNAs，并发现lncRNACACF（Cardiacautophagycontributoryfactor，暂命名）可

能通过调控ATG7的表达促进内皮细胞自噬进而影响血管成型。此外通过生物信息学

手段发现miR-520b-3p、miR-106a和miR-20a-5p可以特异性结合CACF和ATG7

3’UTR区，因此我们推测CACF可能通过介导3个miRNAs调控ATG7的转录表达，

影响血管内皮细胞的自噬。本研究首先通过自噬双标腺病毒侵染人脐静脉内皮细胞

（Humanumbilicalveinendothelialcells，HUVECs）模型，检测CACF对细胞自噬的

影响，然后利用CCK8、EdU、流式细胞术、qRT-PCR等方法分别检测了CACF与3

个候选miRNAs对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡和周期以及部分通路相关基因表达的

影响，最后利用大鼠MI模型，检测CACF对MI后心肌细胞自噬和心脏损伤的影响。

本研究结果为：1.CACF促进HUVECs细胞自噬，促进细胞增殖，周期进程，抑

制细胞凋亡；2.CACF通过竞争性吸附miR-520b-3p促进ATG7的表达，促进

HUVECs细胞自噬；3.miR-520b-3p和miR-106a抑制HUVECs细胞增殖，抑制细胞

周期进程，抑制细胞自噬，促进细胞凋亡；4.miR-20a-5p促进CACF的转录，促进

HUVECs细胞增殖，促进细胞周期进程，抑制细胞凋亡；5.CACF可以促进大鼠MI

后的心功能恢复，降低大鼠MI后的死亡率。

综上所述：miR-20a-5p促进CACF的转录活性，而CACF竞争性吸附miR-520b-

3p促进ATG7表达，促进血管内皮细胞自噬，进而促进MI后的血管再生和MI后的

心功能恢复。本研究通过细胞和活体水平解析了CACF促进细胞自噬，调控血管再

生的机制，为解析猪心肌梗死机制以及心肌梗死后的治疗提供新的科学依据，也为

解决猪心脏异种移植过程中的缺血性损伤问题提供一定的参考。

关键词：心肌梗死；自噬；lncRNA

I

英文缩写词

缩写词英文全称中文全称

AAVadeno-associatedvirus腺相关病毒

ATG7Autophagy-relatedprotein7自噬相关蛋白-7

CACFCardiacautophagycontributoryfactor心脏自噬促进因子

CD31Plateletendothelialcelladhesion血小板-内皮细胞粘附分子

molecule-1

cDNAComplementaryDNA互补脱氧核糖核酸

DEPCDiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯

DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜

EBEthidiumbromide溴化乙啶

ECGSEndothel