备战2025年高考生物考点一遍过考点80PCR技术含解析.docVIP

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考点80PCR技术

1．PCR原理

（1）细胞内DNA复制条件

条件

组分

作用

模板

DNA的两条单链

供应复制的模板

原料

四种脱氧核苷酸

合成DNA子链的原料

酶

解旋酶

DNA聚合酶

打开DNA双螺旋

催化合成DNA子链

能量

ATP

为解螺旋和合成子链供能

引物

RNA

为DNA聚合酶供应合成的3’端起点

（2）细胞内DNA复制过程

①DNA的两条链是反向平行的，通常将DNA的羟基末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端。DNA聚合酶不能从头起先合成DNA，而只能从3’端延长DNA链，因此，DNA复制须要引物。DNA的合成方向总是从子链的5’端向3’端延长。

②在DNA的复制过程中，复制的前提是双链解开。在体外可通过限制温度来实现。在80~100℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性。PCR利用了DNA的热变性原理，通过限制温度来限制双链的解聚与结合。由于PCR过程的温度高，导致DNA聚合酶失活，后来耐高温的DNA聚合酶的发觉和应用，大大增加了PCR的效率。

③PCR反应须要在肯定的缓冲溶液中进行，需供应：DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的DNA聚合酶，同时通过限制温度使DNA复制在体外反复进行。

2．PCR的反应过程

PCR一般要经验三十多次循环，每次循环可以分