遗传性耳聋基因检测试剂盒（PCR-流式荧光杂交法）（CSZ2200216）.docx

—1—

受理号：CSZ2200216

体外诊断试剂产品注册技术审评报告

产品中文名称：遗传性耳聋基因检测试剂盒

（PCR-流式荧光杂交法）

产品管理类别：第三类

申请人名称：广州达安基因股份有限公司

国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心

—2—

目录

基本信息 3

一、申请人名称 3

二、申请人住所 3

三、生产地址 3

技术审评概述 4

一、产品概述 4

二、临床前研究概述 6

三、临床评价概述 10

四、产品受益风险判定 11

综合评价意见 13

—3—

基本信息

一、申请人名称

广州达安基因股份有限公司

二、申请人住所

广州市高新技术产业开发区香山路19号

三、生产地址

广州市高新技术产业开发区香山路19号；广州市高新技术产业开发区荔枝山路6号；广州市黄埔区香山路17号B104号房。

—4—

技术审评概述

一、产品概述

（一）产品主要组成成分

本试剂盒主要组成成分包括试剂I（PCR扩增试剂）：LELPCR反应液A、LELPCR反应液B、LEL酶系、LEL阳性质控品、LEL正常质控品、PCR空白对照，试剂II（杂交试剂）：LEL多重微球杂交液、LEL5×显色工作液、LEL显色稀释液和杂交空白对照。

（二）产品预期用途

本试剂盒用于体外定性检测新生儿干血斑样本基因组DNA中4个遗传性耳聋基因中的17个位点，包括GJB2基因的35delG、176_191del16、235delC、299_300delAT、511_512insAACG位点、GJB3基因的538CT位点、SLC26A4基因的1174AT、1226GA、1229CT、1975GC、2027TA、2162CT、2168AG、IVS7-2AG、IVS15+5GA位点和线粒体12SrRNA基因的1494CT、1555AG位点。

该产品检测结果可用于遗传性耳聋的辅助诊断，可作为常规物理听力筛查的补充，特别是可发现常规物理听力筛查无法检出的药物性致聋基因携带者和迟发性耳聋基因携带者。存在

—5—

部分听力筛查未通过且听力异常，但本产品检测结果为阴性的情况。检测结果仅代表对部分遗传性耳聋相关基因位点的检测，不作为诊断和排除遗传性耳聋的唯一标准。如需确诊病例，应结合患者其他诊断信息对检测结果进行综合判断，或依据相关的诊疗流程对遗传性耳聋进行诊断。

（三）产品包装规格

24人份/盒、48人份/盒。

（四）产品检验原理

本试剂盒基于流式荧光杂交法的原理，针对GJB2基因35delG、176_191del16、235delC、299_300delAT、511_512insAACG位点；GJB3基因538CT位点；SLC26A4基因1174AT、1226GA、1229CT、1975GC、2027TA、2162CT、2168AG、IVS7-2AG、IVS15+5GA位点和线粒体12SrRNA基因1494CT、1555AG位点共17个位点设计PCR引物和杂交探针；利用多重PCR技术获得生物素标记的PCR产物；突变位点的野生型探针（N）和突变型探针（M）与微珠进行共价交联；生物素标记的PCR产物与微珠上偶联的探针进行特异性杂交；杂交过程中加入的显色剂能与PCR产物上标记的基团发生亲和反应；经过上机检测，设备能直接获得每种探针对应的信号值；根据野生型探针与突变型探针的信号比值对检测结果进

—6—

行判断。

本试剂盒添加了相关的防污染组分（尿嘧啶DNA糖基化酶，即UDG/UNG），其作用机理是选择性水解断裂含有dUTP的双链或者单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，形成的有缺失碱基的DNA链，在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂，从而被消除。

二、临床前研究概述

（一）主要原材料研究

1.主要原材料的选择

本产品在制备过程中所用的主要原材料包括引物、探针、热启动Taq酶、dNTPs、UDG酶、微球、LELdpanti-POS、链霉亲和素藻红蛋白、正常人基因组和耳聋杂合质粒，其中正常人基因组、耳聋杂合质粒为申请人自行生产，引物、探针、热启动Taq酶、dNTPs、UDG酶、微球、LELdpanti-POS、链霉亲和素藻红蛋白为外购。

申请人对主要原材料通过功能性试验，筛选出最佳原材料和供应商，制定