2024_2025新教材高中生物第1章发酵工程第2节第2课时微生物的选择培养和计数学案新人教版选择性必修3.docVIP

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第2课时微生物的选择培育和计数

课标内容要求

核心素养对接

1.举例说明通过调整培育基的配方可有目的地培育某种微生物。

2．概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。

1．生命观念：通过实例理解各类微生物都能适应其生活环境。

2．科学思维：依据微生物的代谢类型配制选择培育基；总结分别微生物的过程和测定微生物数量的常用方法。

3．科学探究：探讨土壤中分解尿素的细菌的分别与计数的试验方法并对试验结果进行评价。

一、选择培育基

1．试验室中微生物筛选的原理：人为供应有利于目的菌生长的条件(包括养分、温度和pH等)，同时抑制或阻挡其他微生物的生长。

2．选择培育基概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基。

3．选择培育基配方的设计

(1)原理：分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解产生NH3。

(2)培育基配方设计：以尿素为唯一氮源的选择培育基。

二、微生物的选择培育

1．方法：对土样进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的选择培育基上。

2．稀释涂布平板法的操作过程

(1)系列梯度稀释操作

(2)涂布平板操作

①取菌液：取0.1_mL菌液，滴加到培育基表面。

②涂布器灭菌：取出浸在酒精中的涂布器，放在火焰上灼烧，待酒精燃尽，涂布器冷却后，再进行涂布。

③涂布过程：用涂布器将菌液匀称地涂布在培育基表面，涂布时可转动培育皿，使涂布匀称。

3．培育：待涂布的菌液被培育基汲取后，将平板倒置，放入30～37℃的恒温培育箱中培育1～2d，视察。

三、微生物的数量测定

1．稀释涂布平板法

(1)统计依据

当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推想出样品中大约含有多少活菌。

(2)操作

①选用肯定稀释范围的样品液进行培育，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。

②在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。

2．显微镜干脆计数：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下视察、计数，然后再计算肯定体积的样品中微生物的数量。

四、探究·实践——土壤中分解尿素的细菌的分别与计数

1．提出问题：如何分别土壤中分解尿素的细菌？每克土壤样品中含有多少分解尿素的细菌？

2．基础学问

组分

含量

供应的主要养分

KH2PO4

1.4g

无机盐

Na2HPO4

2.1g

MgSO4·7H2O

0.2g

葡萄糖

10.0g

碳源

尿素

1.0g

氮源

琼脂

15.0g

凝固剂

H2O

定容至1000mL

水

3．试验设计

(1)土壤取样：先铲去表层土，取距地表3～8cm的土壤层，将样品装入纸袋

(2)样品的稀释：一般选用1×104、1×105、1×106倍稀释的稀释液进行平板培育。

(3)微生物的培育与视察：细菌一般在30～37_℃的温度下培育1～2天，每隔24_h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。

推断对错(正确的打“√”，错误的打“×”)

1．选择分解尿素的细菌的培育基为液体培育基。 (×)

提示：选择分解尿素的细菌的培育基为固体培育基，固体培育基具有分别、鉴定作用。

2．由于运用了选择培育基，因此本试验不须要设置比照组。 (×)

提示：应当设置未接种的平板和接种在牛肉膏蛋白胨培育基的平板作为比照。

3．在用涂布器涂布平板时，为了操作便利可完全打开培育皿盖。 (×)

提示：为了防止杂菌污染，不能完全打开皿盖。

4．在同一稀释度下，至少要涂布3个平板。 (√)

5．当菌落数目稳定时，选取菌落数为30～300的平板进行计数。 (√)

6．统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数目。 (×)

提示：由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上视察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。

微生物的选择培育与计数方法

1．选择培育的目的：从众多微生物中分别出须要的特定微生物。

2．筛选微生物常用培育基——选择培育基和鉴别培育基

选择培育基

鉴别培育基

特别成分

限制某一条件(如唯一氮源)或加入某种物质(如青霉素)

加入某种指示剂或化学药品

目的

抑制其他微生物生长，促进目的微生物的生长

与微生物的代谢产物或培育基中的成分发生特定反应

用途

培育、分别出特定微生物

鉴别不同的微生物

举例

培育酵母菌和霉菌，可在培育基中加入青霉素，抑制细菌生长；用以尿素为唯一氮源的培育基来培育尿素分解菌

可用伊红—美蓝培育基鉴定饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)

3．稀释涂布平板法

(1)主要操作环节：系列梯度稀释和涂布平板。

(2)系列梯度稀释和涂布平板后培育结果如图所示：

(3)计算公式：

每克样品中的菌株