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1.2.1微生物的培养技术及应用
微生物的基本培养技术
目录
CONTENTS
微生物
培养基
灭菌技术
微生物的纯培养
01
02
03
04
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DIFFERENT?
85%
实验室操作
“
日常消毒
微生物的培养技术及应用
”
微生物
微生物是人们对所有形体微小、肉眼不可见的生物的统称。
大肠杆菌菌落
高倍光学显微镜下的酵母菌
电镜下新冠病毒
细菌(原核生物)
无核膜包被的细胞核。
某些细菌会在营养缺乏或代谢产物积累的环境中形成没有繁殖功能的休眠构造,称为芽孢。芽孢对恶劣环境具有极强抵抗力。芽孢在条件适宜时会重新成为一个细菌。
微生物
真菌(真核生物)
有核膜包被的细胞核。
酵母菌(出芽生殖),霉菌、蘑菇等(孢子生殖),孢子是生殖细胞,对恶劣环境也有极强抵抗力。
病毒(无细胞结构),在活细胞体内寄生。脱离活细胞会形成结晶体状态。
培养基
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
分类
标准
培养基种类
培养基特点
作用
物理
性质
固体培养基
外观固态
微生物的分离、计数等
液体培养基
呈液态
常用于工业生产
功能
选择培养基
允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长
选择、分离
鉴别培养基
根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品
鉴定
成分
来源
天然培养基
化学成分还不清楚
工业上大规模的微生物发酵生产
合成培养基
化学成分完全了解
在实验室用来对微生物分析
培养基
成分:一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。某些培养基还需要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的需求。
碳源
凡能提供所需碳元素的物质
构成生物体细胞的物质和一些代谢产物,有些是异养生物的能源物质
无机碳源:CO2、NaHCO3等;
有机碳源:糖类、脂肪酸、花生饼粉、石油等
氮源
凡能提供所需氮元素的物质
合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物
无机氮源:NH3、铵盐、硝酸盐等;
有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨等
培养基
细菌培养基:含有较高的有机氮,常用蛋白胨和酵母提取物等配制;中性偏碱。
霉菌培养基:常用可溶性淀粉加无机物配制,或用添加蔗糖的豆芽汁等配制;中性偏酸。
细菌喜荤霉菌喜素
细菌喜碱,霉菌喜酸
无菌技术
消毒
灭菌
无菌技术
消毒vs灭菌
无菌技术
消毒vs灭菌
请回答下列问题:
1.实验器具用什么方法灭菌?
2.培养基用什么方法灭菌?
3.双手用什么方法消毒?
4.接种环用什么方法灭菌?
5.涂布器用什么方法灭菌?
6.为保证无杂菌,实验操作都要在哪里进行?
7.如何制备无菌水?
高压蒸汽灭菌法
灼烧灭菌法
浸泡在75%酒精中,使用前灼烧
超净工作台的酒精灯火焰旁
用三角瓶装水,高压蒸汽灭菌法灭菌
高压蒸汽灭菌法
75%酒精擦拭
微生物的纯培养
平板划线法
稀释涂布平板法
微生物的纯培养
平板划线法
平板划线操作中三种灼烧的目的不同
1.蘸取菌液前灼烧
2.每次划线前灼烧
3.划线操作结束后灼烧
避免接种环上可能存在的微生物污染菌种。
杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端。
及时杀死接种环上残留的菌种,避免菌种污染环境和感染操作者。
注意:
1.蘸取菌种前和划线后,接种环都要灼烧灭菌。
2.菌种只蘸取一次。
稀释涂布平板法
微生物的纯培养
酵母菌的纯培养
思考:
1.马铃薯浸汁为酵母菌生长提供了哪些成分?
2.蔗糖属于该培养基的什么成分?
3.琼脂的作用?
4.琼脂可以作为酵母菌生长的碳源吗?
5.为什么制作棉塞不能用脱脂棉?
培养酵母菌
接种和分离酵母菌
倒平板
灭菌
配制培养基
微生物的纯培养
酵母菌的纯培养
思考:
1.马铃薯浸汁为酵母菌生长提供了哪些成分?
2.蔗糖属于该培养基的什么成分?
3.琼脂的作用?
4.琼脂可以作为酵母菌生长的碳源吗?
5.为什么制作棉塞不能用脱脂棉
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