1.2.2微生物的选择培养和计数 课件 高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

高中生物学选择性必修三第一章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用（第二课时）

目录CONTENTS/一、选择培养基二、微生物的选择培养三、微生物数量的测定

自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。那么我们又如何达成这一目标呢？科学家们应用选择性培养基解决了这一难题。

一、选择培养基科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶PCR是一种在体外DNA复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。耐高温的酶耐高温生物体高温环境（热泉、火山口）寻找寻找筛选思路：筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。美国黄石公园

一、选择培养基启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。耐寒微生物耐热微生物石油分解菌问题1：这对在实验室中选择培养特定的微生物有什么启示？实验室中如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？

一、选择培养基筛选抗青霉素能力的细菌实例1培养基中加青霉素具有青霉素抗性的菌落培养基应有菌落没有青霉素抗性的细菌被淘汰

一、选择培养基1.概念：类型条件分离得到的菌种（1）改变培养条件（2）添加某种化学物质（3）营养缺陷70～80℃的高温水生栖热菌加入青霉素酵母菌、霉菌等真菌高浓度食盐金黄色葡萄球菌不加含碳有机物不加氮源自养型微生物固氮菌在微生物学中，允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，叫做选择培养基。2.类型：

一、选择培养基任务1：请同学们自主学习教材P16页的资料。细菌利用尿素的原因他们能合成脲酶。CO(NH2)2+H2O2NH3+CO2脲酶问题2：你如何设计培养基配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？培养基添加尿素作唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于缺乏氮源而不能生长发育繁殖，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

一、选择培养基任务1：请同学们自主学习教材P16页，小组合作思考讨论以下问题。细菌利用尿素的原因他们能合成脲酶。CO(NH2)2+H2O2NH3+CO2脲酶问题3：该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。

一、选择培养基问题4：同理：将土壤稀中能分解纤维素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？设计一种选择培养基,用纤维素作为唯一碳源,可以将分解纤维素的细菌分离出来问题5：将土壤中能分解石油的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？设计一种选择培养基,用石油作为唯一碳源,可以将分解石油的细菌分离出来

二、微生物的选择培养情境问题：某研究小组想知道1g土壤样品中有多少能分解尿素的细菌，仅通过选择培养基可以知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌吗？分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物计数：测定分解尿素的细菌的数量问题6：由于土壤细菌的数量庞大，怎么获得要想得到特定微生物的纯培养物呢？分离方法：稀释涂布平板法

二、微生物的选择培养任务2：请同学们自主学习教材P17-18页，观看稀释涂布平板法操作视频。

二、微生物的选择培养1.方法：由于土壤细菌的数量庞大，要想得到特定微生物的纯培养物，必须要对土壤进行___________,然后再将菌液_____到制备好的____________上。充分稀释涂布选择培养基稀释涂布平板法2.基本操作：和。梯度稀释涂布平板

二、微生物的选择培养1、稀释涂布平板法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。土壤中分解尿素的细菌的分离与计数绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。[资料卡]常见的分解尿素的微生物：芽孢杆菌、小球菌、棒状杆菌等细菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。葡萄糖10.0g尿素1.0gKH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g琼脂15.0g蒸馏水1000mlKH2PO4和Na2HPO4的作用是：①提供无机盐；②调节pH。

二、微生物的选择培养2、实验的具体操作：（1）土壤取样从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。取土样用的小铁铲和盛土样的