菌种的来源课件.pptVIP

黃色短桿菌F9-50的誘變譜系BervibacteriumflavumAs1.495(leu-)lys.HCl2.1g/lF6-16(leu-,Thr-)20.8g/lF9-50(leu-,Thr-,AECr)33.5g/l菌種的來源第一節微生物的特性及工業微生物的要求一、微生物的特性有些微生物能在厭氧的條件下生長有些微生物能夠利用簡單的有機物和無機物滿足自身的生長有些微生物能進行複雜的代謝有些微生物能利用較複雜的化合物有些微生物能在極端的環境下生長二：工業化菌種的要求能夠利用廉價的原料，簡單的培養基，大量高效地合成產物有關合成產物的途徑盡可能地簡單，或者說菌種改造的可操作性要強遺傳性能要相對穩定不易感染它種微生物或噬菌體產生菌及其產物的毒性必須考慮（在分類學上最好與致病菌無關）生產特性要符合工藝要求放線菌（鏈黴素四環素；紅黴素等）真菌（青黴素、頭孢等）一些產芽孢的細菌植物或動物來源一、抗生素生產有關的微生物抗生素是次級代謝產物，需要生物體進行複雜的代謝，目前發現的生物來源如下：第二節已工業化產品生產菌的介紹二、氨基酸生產有關的微生物代謝控制發酵：用人工誘變的方法，有意識地改變微生物的代謝途徑，最大限度地積累產物，這種發酵形象地稱為代謝控制發酵，最早在氨基酸發酵中得到成功應用。50,60年代以氨基酸發酵為代表的代謝控制發酵，是發酵工業發展歷史上的一個轉捩點：HD:高絲氨酸脫氫酶黃色短桿菌中賴氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸和異亮氨酸的合成調節機制HT:高絲氨酸轉乙醯酶AK:天冬氨酸激酶氨基酸生產菌的要求：代謝途徑比較清楚，代謝途徑比較簡單谷氨酸發酵的菌種：其他氨基酸生產菌：棒桿菌屬，短桿菌屬、節桿菌屬或小桿菌屬的棒型細菌常規菌種一般也是以谷氨酸生產菌選育而成；工程菌，大腸桿菌，枯草芽孢桿菌三、食品酶製劑生產有關的微生物開發一個新酶，都要經過一系列研究的毒理試驗。關於食品用酶，美國需要得到FDA的批准。目前已同意使用的僅僅少數微生物能用於生產食品用酶。α—澱粉酶：黑麯黴、米麯黴、米根酶、枯草牙孢桿菌和地衣牙孢桿菌三、常用的基因表達系統(一)原核生物：大腸桿菌(1977年Boyer)、枯草牙胞桿菌沙門氏菌生長迅速、蛋白產量高;表達蛋白的純化、分離及分析快速；外源基因的導入相對容易；已建立了整套表達理論及技術.(二)真核細胞表達系統酵母(既是微生物又是真核細胞)生長迅速，營養要求不高，易培養；安全性好；比哺乳動物細胞操作簡單；具有一定的修飾蛋白的能力。中國倉鼠卵巢細胞（CHO細胞）表達系統具有準確的轉錄後修飾功能；具有產物胞外分越功能，便於下游產物分離純化；具有重組基因的高效擴增和表達能力；具有貼壁生長特性，也可進行懸浮生長；CHO很少分泌自身的內源蛋白。微生物（包括動、植物細胞）幾乎可以生產我們所需的一切產品，但是涉及到工業化生產對於某一種特定的產品，只有特定的微生物才具有大量表達的潛力。問題：生產抗生素的微生物能不能用於生產氨基酸？禮來(Elililly),花了10年的時間從40萬株微生物中，發現了三種有潛力的新抗生素。例：第三節自然界中有目的微生物分離的原則一、菌種分離的一般過程土樣的採取→預處理→培養→菌落的選擇→產品的鑒定如何使樣品中所含微生物的可能性大如何在後續的操作中使這種可能性實現目的：高效地獲取一株高產目的產物的微生物問題：二、採樣時要注意的問題氣候、水分、空氣來源要廣結合產品的特點標籤：地點、時間、氣候等富集的三種方案：定向培養:採用特定的有利於目的微生物富集的條件，進行培養。三、目的微生物富集的一些基本方法富集的目的：讓目的微生物在種群中佔優勢，使篩選變得可能。當不可能採用定向培養時，則可設計在一個分類學中考慮，不能提供任何有助於篩選產生菌的資訊，這時只能通過隨機分離的辦法定向培養的方法物理方法：加熱、膜過濾等，表2-2（P31）但主要是通過培養的方法定向培養的富集方法1、底物2、pH條件3、培養時間4、培養溫度等一切能提高目的微生物相對生長速度的手段，培養（固體、液體；分批連續）後使目的微生物在種群中佔優勢。四、菌落的選出從產物角度出發在培養時