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2025年pcr新冠培训上岗试卷及答案

一、单项选择题（每题2分，共20题，合计40分）

1.新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的核酸类型为：

A.单链正股RNA（+ssRNA）

B.单链负股RNA（-ssRNA）

C.双链DNA（dsDNA）

D.单链DNA（ssDNA）

2.荧光定量PCR技术中，“Ct值”的定义是：

A.扩增产物达到设定荧光阈值时的循环次数

B.扩增产物荧光信号达到平台期的循环次数

C.引物与模板结合的最适温度

D.探针水解产生荧光的最大强度值

3.新冠病毒PCR检测实验室的核心工作区域不包括：

A.试剂准备区

B.样本处理区

C.扩增分析区

D.废弃物暂存区

4.进行新冠病毒核酸提取时，若使用磁珠法，关键步骤不包括：

A.细胞裂解释放核酸

B.磁珠与核酸特异性结合

C.高温变性破坏病毒结构

D.洗涤去除杂质后洗脱核酸

5.新冠病毒PCR检测中，内参基因（如RPP30）的主要作用是：

A.验证扩增体系有效性

B.区分不同变异株

C.提高检测灵敏度

D.减少气溶胶污染

6.实验室收到一份新冠核酸检测样本（咽拭子），若无法立即检测，正确的保存条件是：

A.4℃保存不超过24小时，-20℃可长期保存

B.常温保存不超过6小时

C.37℃保存不超过12小时

D.-80℃保存不超过7天

7.以下哪种操作最易导致PCR实验室气溶胶污染？

A.手动移液时移液器未规范使用滤芯吸头

B.样本灭活时使用56℃水浴30分钟

C.核酸提取后立即进行扩增

D.实验结束后用75%酒精擦拭台面

8.新冠病毒ORF1ab基因与N基因同时阳性（Ct≤37），且内参基因阳性，应判定为：

A.阳性

B.阴性

C.无效结果

D.复检

9.荧光定量PCR反应体系中，Taq酶的主要功能是：

A.催化dNTP聚合形成DNA链

B.水解探针释放荧光基团

C.结合模板DNA解旋

D.稳定反应体系pH值

10.关于新冠病毒核酸检测的生物安全要求，错误的是：

A.样本处理区需在生物安全柜内操作

B.实验人员需穿戴N95口罩、一次性手套、防护服

C.废弃标本可直接按生活垃圾处理

D.实验室空气需经高效过滤器（HEPA）过滤后排放

11.以下哪种引物设计原则不符合新冠病毒PCR检测要求？

A.引物长度18-25个核苷酸

B.引物GC含量40%-60%

C.引物3’端避免连续G/C

D.引物序列与宿主基因组高度同源

12.若某样本扩增曲线呈“平台期未达”（Ct值40），且内参基因阴性，最可能的原因是：

A.样本中病毒载量极低

B.扩增体系失效（如酶活性降低）

C.样本采集量不足

D.气溶胶污染

13.新冠病毒核酸检测的灵敏度通常定义为可检测的最低病毒载量，一般要求达到：

A.100拷贝/反应

B.1000拷贝/反应

C.10拷贝/反应

D.1拷贝/反应

14.实验室质量控制中，“弱阳性对照”的作用是：

A.验证检测系统对低浓度样本的检测能力

B.排除假阳性

C.监测扩增仪温度准确性

D.评估试剂批间差异

15.进行新冠病毒核酸提取时，若使用离心柱法，关键步骤的离心参数通常为：

A.12000rpm，1分钟

B.3000rpm，5分钟

C.8000rpm，10分钟

D.5000rpm，3分钟

16.以下哪种情况不属于“假阴性”结果的可能原因？

A.样本采集部位不准确（如咽拭子未接触扁桃体）

B.病毒处于潜伏期，载量低于检测限

C.扩增仪温度校准偏差导致扩增效率降低

D.样本中存在PCR抑制物（如血红蛋白）

17.荧光定量PCR的“熔解曲线分析”主要用于：

A.验证扩增产物的特异性

B.计算病毒载量

C.确定最佳退火温度

D.监测反应体系pH变化

18.新冠病毒核酸检测报告中，“未检测到SARS-CoV-2核酸”的表述适用于：

A.所有阴性结果

B.仅当内参基因阳性时的阴性结果

C.仅当扩增曲线无信号时的结果

D.所有无效结果

19.实验室发生样本泄漏事故后，正确的处理流程是：

A.立即用吸水纸覆盖，喷洒10%次氯酸钠溶液，30分钟后清理

B.直接用75%酒精擦拭，无需等待

C.用清水冲洗后通风即可

D.更