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三株中光层海绵共附生放线菌活性代谢产物研究

摘要

近年来，由于人们在预防和治疗动植物疾病等方面过度使用抗生素，导致环

境中细菌的耐药性逐年增强。研究表明，抗生素使用不当会加快抗生素耐药菌在

大气、海洋和土壤中的传播，因此，迫切需要新的抗生素来有效地对抗耐药细菌。

而如今，从普通生态环境中寻找新的抗生素比以前更具挑战性，为了获取新的放

线菌资源，更多的学者将目光投向了特殊生境如深海、沙漠、盐湖等，希望从独

特的生态环境中获得优秀的药用放线菌，进而发现新抗生素。

本课题采用多种选择性培养基对来自海洋中光层珊瑚礁生态系统（Marine

mesophoticcoralreefecosystems）的两株海绵进行分离纯化，共得到17株放线菌。在

“OSMAC”策略指导下，通过改变培养基成分进行优化培养，对不同条件下的发

酵产物进行活性评价和成分分析，筛选出三株海绵共附生放线菌Streptomycessp.

NBU3428,Streptomycessp.NBU3429和Streptomycessp.NBU3430。首先将三株放

线菌进行大量发酵，采用乙酸乙酯提取发酵产物，通过减压柱层析（VLC）、中压

柱层析（MPLC）和高效液相色谱（HPLC）等多种色谱方法对三株菌的粗提物进

行分离纯化。综合运用MS、UV、NMR等多种波谱方法确定了化合物的平面结

构，并运用NOESY、X-ray单晶衍射和量子化学ECD计算确定了这些化合物的

绝对构型。

从放线菌Streptomycessp.NBU3428粗提物中共分离得到8个倍半萜类化合

物，包括4个新化合物（1-4），4个已知化合物（5-8）。从放线菌Streptomyces

sp.NBU3429共分离和鉴定了2个已知的吲哚生物碱类化合物（9和10）。从放线

菌Streptomycessp.NBU3430共分离鉴定了14个化合物，包括一个新的化合物

（14）和13个已知化合物，其中化合物11-13为α-吡喃酮衍生物，16-18为倍半

萜类，14、15、19和20为脂肪酸类结构，21-24为巴普洛霉素衍生物。

对这三株放线菌中分离纯化得到的24个单体化合物进行抗肿瘤、抗菌和

MRSA生物膜抑制试验，通过活性实验发现倍半萜降解产物1和2、脂肪酸类

和巴普洛霉素衍生物均对白色念球菌表现出良好抑菌活性MIC值为（2-64

μg/mL）。在抗肿瘤实验中，化合物9、10和21-24显示出明显的肿瘤细胞抑制效果IC50

分别为（HL-60：3.44-13.64μM；HepG2：4.43-29.83μM；CCRF-CEM：7.61-14.96

μM）。在本研究中，发现化合物10对MRSA具有良好的抑制效果，深入研究

了其抗菌和抗生物膜活性，发现化合物10可以通过破坏细菌生物膜形成来杀

灭细菌，在浓度64-512μg/mL的条件下作用24h，生物膜的形成率分别降低

了12.7%-84.6%。这为进一步挖掘中光层海绵共附生放线菌多样性及其天然产

物药用价值提供了科学依据。

关键词：中光层珊瑚礁生态系统，海绵，放线菌，次级代谢产物，生物活性

Studyonbioactivesecondarymetabolitesfromthreemarine

mesophoticzonesponge-associatedactinomycetes

Abstract

Inrecentyears,duetotheoveruseofantibioticsinthepreventionandtreatmentofanimaland

plantdiseases,theresistanceofbacteriaintheenvironmentisincreasingyearbyyear.Research

showsthatinappropriate