酶催化反应动力学课件.pptxVIP

酶催化反應動力學;酶催化反應動力學也稱酶促反應動力學（kineticsofenzyme-catalyzedreactions），是研究酶促反應速度以及影響此速度的各種因素的科學。在研究酶的結構與功能的關係以及酶的作用機制時，需要酶促反應動力學提供相關的實驗證據；為了找到最有利的反應條件從而提高酶催化反應的效率以及瞭解酶在代謝過程中的作用和某些藥物的作用機制等，也需要我們掌握酶促反應動力學的相關規律。因此，對於酶促反應動力學的研究既有重要的理論意義又具有相當的實踐價值。

;酶促反應動力學以化學動力學為基礎，通過對酶促反應速度的測定來討論諸如底物濃度、抑制劑、溫度、pH和啟動劑等因素對酶促反應速度的影響。;溫度、pH及啟動劑都會對酶促反應速度產生十分重要的影響，酶促反應不但需要最適溫度和最適pH，還要選擇合適的啟動劑。而且在研究酶促反應速度以及測定酶的活力時，都應選擇相關酶的最適反應條件。;3.1酶催化反應速度;圖3-1酶促反應的速度曲線;引起酶促反應速度隨反應時間延長而降低的原因很多，如底物濃度的降低、產物濃度增加從而加速了逆反應的進行、產物對酶的抑制或啟動作用以及隨著反應時間的延長引起酶本身部分分子失活等等。因此在測定酶活力時，應測定酶促反應的初速度，從而避免上述各種複雜因素對反應速度的影響。由於反應初速度與酶量呈線性關係，因此可以用測定反應初速度的方法來測定相關製劑中酶的含量。;酶活力測定時需注意：;測定酶活力的基本原理;測定酶活力常用的方法：;3.2底物濃度對酶促反應速度的影響;圖3-2底物濃度對酶促反應速度的影響;從該曲線圖可以看出，當底物濃度較低時，反應速度與底物濃度的關係呈正比關係，反應表現為一級反應。然而隨著底物濃度的不斷增加，反應速度不再按正比升高，此時反應表現為混合級反應。當底物濃度達到相當高時，底物濃度對反應速度影響逐漸變小，最後反應速度幾乎與底物濃度無關，這時反應達到最大反應速度（Vmax），反應表現為零級反應。;根據這一實驗結果，Henri和Wurtz提出了酶促化學反應的酶底物中間絡合物學說。該學說認為：當酶催化某一化學反應時，酶(E)首先需要和底物(S)結合生成酶底物中間絡合物即中間複合物(ES)，然後再生成產物(P)，同時釋放出酶。該學說可以用下麵的化學反應方程式來表示：

S+EES→P+E

;我們根據中間絡合物學說很容易解釋圖3-2所示的實驗曲線，在酶濃度恒定這一前提條件下，當底物濃度很小時酶還未被底物所飽和，這時反應速度取決於底物濃度並與之成正比。隨著底物濃度不斷增大，根據品質作用定律，中間複合物ES生成也不斷增多，而反應速度取決於ES的濃度，故反應速度也隨之增高但此時二者不再成正比關係。;當底物濃度達到相當高的程度時，溶液中的酶已經全部被底物所飽和，此時溶液中再也沒有多餘的酶，雖增加底物濃度也不會有更多的中間複合物ES生成，因此酶促反應速度變得與底物濃度無關，而且反應達到最大反應速度（Vmax）。當我們以底物濃度[S]對反應速度v作圖時，就形成一條雙曲線。在此需要特別指出的是，只有酶促催化反應才會有這種飽和現象，而與此相反，非催化反應則不會出現這種飽和現象。;酶促反應的動力學方程式（米氏方程）;米氏常數的含義;米氏常數的應用價值;3.3抑制劑對酶促反應速度的影響;由於抑制作用與變性作用從本質而言是不同的，因此與變性劑對酶的變性作用無選擇性不同的是，抑制劑對酶的抑制作用是有選擇性的，即一種抑制劑只能使某一種酶或對某一類酶產生抑制作用。

;對酶抑制作用的探討是研究酶的結構與功能、酶的催化機制以及闡明機體代謝途徑的基本手段，也可以為醫藥產業中設計新藥物和農業生產中設計新農藥提供重要的理論依據，從這個角度而言，對酶抑制作用的研究不僅具有重要的理論意義，而且具有突出的實踐價值。;3.3.1抑制作用的類型;3.3.1.1不可逆的抑制作用;不可逆抑制劑;;;3.3.1.2可逆的抑制作用;;①競爭性抑制(competitiveinhibition)：

是最常見的一種可逆抑制作用。抑制劑(I)與底物(S)競爭酶(E)的同一結合部位，因此抑制劑的存在直接影響底物與酶的正常結合。這是由於酶的活性部位不能同時既與底物結合又與抑制劑結合，所以在底物和抑制劑之間會產生競爭，從而形成一定的平衡關係。;對於絕大多數競爭性抑制劑而言，其結構與底物結構十分類似，因此也能與酶的活性部位結合形成可逆的酶-抑制劑複合物EI，但酶-抑制劑複合物EI不能分解成產物P，導致相應的酶促反應速度下降。其抑制程度取決於底物和抑制劑的相對濃度，可以通過增加底物濃度的方法來解除這種抑制作用。這類抑制最典型的例子是丙二酸和戊二酸競爭與琥珀酸脫氫酶結合，但不能催化脫