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2025年荧光试题和答案

一、单项选择题（每题3分，共15分）

1.下列关于荧光产生的能级跃迁描述中，正确的是（）

A.基态单重态S?→激发三重态T?

B.激发单重态S?→基态单重态S?

C.激发三重态T?→基态单重态S?

D.基态单重态S?→激发单重态S?

2.某新型荧光材料在365nm紫外光激发下发射520nm绿光，其斯托克斯位移为（）

A.155nm

B.135nm

C.105nm

D.85nm

3.下列因素中，不会导致荧光淬灭的是（）

A.溶液中存在O?分子

B.荧光分子与猝灭剂形成稳定复合物

C.降低溶液温度

D.荧光分子发生浓度自猝灭

4.衡量荧光材料发光效率的关键参数是（）

A.摩尔吸光系数

B.荧光寿命

C.量子产率

D.斯托克斯位移

5.用于生物活细胞成像的荧光探针通常需要具备的特性不包括（）

A.长波长发射（＞650nm）

B.高生物相容性

C.短荧光寿命（＜1ns）

D.良好的光稳定性

二、填空题（每空2分，共20分）

1.荧光发射的本质是激发态分子通过________跃迁回到基态时释放的光能，其寿命通常在________量级。

2.荧光量子产率的定义是________与________的比值。

3.动态荧光淬灭的主要机制是________，而静态淬灭的特征是形成________。

4.钙钛矿量子点作为荧光材料的优势包括________、________（任写两点）。

5.近红外二区（NIR-II，1000-1700nm）荧光成像的主要优势是________、________。

三、简答题（每题10分，共30分）

1.简述荧光与磷光的主要区别，需从激发态类型、寿命、温度依赖性三方面说明。

2.解释“浓度猝灭”现象的产生机制，并列举两种抑制浓度猝灭的方法。

3.设计一种基于荧光共振能量转移（FRET）的生物传感器，需说明供体-受体对的选择原则、检测原理及应用场景。

四、计算题（15分）

已知标准荧光物质罗丹明6G的量子产率Φ_std=0.95，其在激发波长520nm下的吸光度A_std=0.08，发射光谱积分面积I_std=12000。待测荧光材料X在相同激发波长下的吸光度A_x=0.12（A＜0.05时满足稀溶液条件，本题忽略自吸收），发射光谱积分面积I_x=8500。假设两者溶剂相同且折射率n_std=n_x=1.33，计算材料X的量子产率Φ_x（保留3位有效数字）。

五、综合分析题（20分）

2024年，某团队开发了一种新型近红外荧光探针（发射波长1100nm），用于小鼠肿瘤的活体成像。实验显示，该探针在生理条件下（pH7.4，37℃）的量子产率为0.18，荧光寿命为6.2ns，与肿瘤细胞表面受体的结合常数K_a=1.2×10?L/mol?1，且在连续光照30min后荧光强度仅下降8%。结合荧光材料的性能参数与生物成像需求，分析该探针的优势与潜在改进方向。

答案

一、单项选择题

1.B（荧光为S?→S?的辐射跃迁，T?→S?为磷光）

2.A（斯托克斯位移=发射波长-激发波长=520-365=155nm）

3.C（降低温度通常抑制分子热运动，减少非辐射跃迁，可能增强荧光）

4.C（量子产率Φ=发射光子数/吸收光子数，直接反映发光效率）

5.C（活细胞成像需长寿命荧光以区分自发荧光，短寿命不利于检测）

二、填空题

1.辐射；纳秒（10??s）

2.发射的荧光光子数；吸收的激发光子数

3.激发态荧光分子与猝灭剂碰撞失活；荧光分子-猝灭剂基态复合物

4.发射光谱窄、量子产率高（或可调谐发射波长、制备成本低）

5.组织穿透深、自发荧光干扰小

三、简答题

1.①激发态类型：荧光源于单重态激发态S?→S?跃迁；磷光源于三重态激发态T?→S?跃迁。②寿命：荧光寿命短（纳秒级），磷光寿命长（微秒至秒级）。③温度依赖性：荧光受温度影响较小；磷光因需要跨越自旋禁阻，低温下更易观测（高温时T?态易通过热失活耗散能量）。

2.浓度猝灭机制：当荧光分子浓度过高时，分子间距离减小，激发态分子通过碰撞、能量转移（如自吸收或形成无辐射的激发态二聚体）将能量传递给基态分子，导致荧光减弱。抑制方法：①稀释溶液至合适浓度（通常＜10??mol/L）；②将荧光分子分散在刚性基质（如聚合物、介孔材料）中，减少分子间相互作用；③引入空间位阻基团（如大体积取代基），阻碍分子聚集。

3.设计示例：检测ATP的FRET传感器。①