分子生物学：真核基因表达调控.pptVIP

活跃表达的基因所在染色质上包含一个或数个DNaseⅠ超敏感位点，常出现在转录基因的5‘端启动区，多在调控蛋白结合位点的附近，该处易被核酸酶降解，使DNA裸露，启动基因表达*在细胞分化过程中，可以通过丢失掉某些基因而去除这些基因的活性。某些原生动物、线虫、昆虫和甲壳类动物在个体发育中，许多体细胞常常丢失掉整条或部分的染色体，只有将来分化产生生殖细胞的那些细胞一直保留着整套的染色体。**在真核细胞中RNA聚合酶通常不能单独发挥转录作用，而需要与其他转录因子共同协作。**转录激活因子多数是增强子结合蛋白转录抑制因子多数是沉默子结合蛋白，有些也通过蛋白质-蛋白质相互作用3、HSE的特点位于hsp基因的上游保守序列为CNNNGAANNTCCNNC,被HSF特异性识别几乎存在于所有的Hsp基因序列中。把HSE连接在其它基因的上游，该基因可获得热诱导性。4、HSF介导的HSP表达调控（1）HSF的结构特点：DNA结合区：位于N端，负责结合HSE疏水重复区：含4个Leu拉链区，与分子构象的保持和改变有关C末端（452～488）保守区，维持HSF的单体构象（2）热休克应答的调控机制常温下，HSF在体内以单体存在，不与DNA结合（无活性），这是由于拉链1,4相互作用，阻断三体形成，加上Hsp70,Hsp90的共同作用，维持HSF单体形式。热激后，大量变性和错误折叠的蛋白质出现,与Hsp70,Hsp90竞争结合，使HSF拉链区暴露，形成三聚体，与HSE结合，调控Hsp的表达。HSF在常温和热激后的构象变化HSF解离，形成HSF单体多聚化与HSE结合三体磷酸化HSP积累，可与HSF结合脱离HSE热激四、金属硫蛋白基因的多重调控金属硫蛋白（metallothionein，MT）基因，其5端调控区有着十分复杂的结构，包含许多调控元件，可以同时受几种转录因子的影响。作为细胞内多余重金属离子的螯合蛋白，这个基因平时就有本底水平的表达，还能受重金属离子（如镉）或糖皮质的诱导而高效表达。该基因5’端调控区除了含有TATA区和GC区外，还有两个序列类似于增强子的本底水平调控元件（basallevelelement，BLE），它们共同参与了该基因本底水平的表达。金属离子对该基因转录的诱导是由数个MRE序列介导的。人金属硫蛋白基因5’上游-40～-160处含有4个MRE序列。虽然单一MRE序列足以引发重金属离子诱导的基因表达，多个MRE序列被认为有利于该基因大量表达。位于MT基因5’上游-240～-260bp处的GRE，是固醇类激素受体的结合位点。删除这个区域不影响基因的本底水平表达和受金属离子诱导的特性，但不再对激素诱导作出反应。金属硫蛋白基因的多重调控机制糖皮质激素应答元件基础水平元件金属应答元件佛波酯应答元件GC区TATA区第五节其他水平上的基因调控一、RNA的加工成熟（转录后水平）二、翻译水平（包括翻译后）的调控在真核生物基因表达的调控中，DNA水平和转录水平上的调控占有十分重要的地位，但其他水平上的调控也不能忽视。包括：RNA的加工成熟、RNA由胞核转运到胞质、翻译水平的调控以及翻译后多肽链的加工等一、RNA的加工成熟各种基因的转录产物都是RNA，无论是rRNA、tRNA还是mRNA，初级转录产物只有经过加工，才能成为有生物功能的活性分子。1rRNA和tRNA的加工成熟rRNA加工有两个内容，一个是分子内的切割，另一个是化学修饰。真核生物的rRNA基因转录时，先产生一个45S的前体rRNA，然后被核酸酶逐渐降解，形成成熟的18S、28S和5.8SrRNA。?rRNA的化学修饰主要是甲基化，原核生物rRNA主要是碱基甲基化，而真核生物rRNA则主要是核糖甲基化。2．mRNA的加工成熟这些加工主要包括在mRNA的5’末端加“帽子”，在其3’末端加上多聚（A），进行RNA的剪接以及核苷酸的甲基化修饰等。由于mRNA的这些结构与它作为蛋白质合成模板的功能有密切关系，所以是基因表达的重要调控环节。???与rRNA、tRNA相同，编码蛋白质的基因转录时首先生成前体pre-mRNA（或称核不均一RNA，hnRNA），然后再加工剪接为成熟mRNA。3．真核生物基因转录后加工的多样性真核生物的基因可以按其转录方式分为两大类：简单转录单位复杂转录单位(1)简单转录单位。这类基因只编码产生一个多肽，其原始转录产物有时需要加工，有时则不需要加工。第一种简单转录单位，如组蛋白基因，它们没有内含子，因此不存在转录后加工问题，其mRNA3’末端没有多聚（A），但有一个保