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娄底职业技术学院李继仁;课时教学计划;带着问题学;5.3精液品质检查;精液检查基本操作原则:
(1)采得精液立即于30℃左右恒温容器中,标记来源。
(2)作好检查准备工作,检查时应快捷,及时作处理。
(3)操作时,避免损害精液品质,接触精子的玻棒等应洗净。
(4)取样应有代表性(摇匀)。
(5)项目较多,不应每次都面面俱到,应常规和全面检查相结合。
(6)评定质量等级,应对各项结果作全面综合分析,可重复某个项目。;精液外观检查
1)采精量:一次射精数量。牛羊精液可用带有刻度的集精瓶(管)直接测出,猪马精液用天平称量射精量。牛5~8ml、马60~100ml、猪200~300ml、羊0.8~1.2ml。;2)色泽:乳白或乳黄。肉眼观察。乳白色程度越大表示精子密度越高。若呈淡绿色,表示混有脓汁;呈淡红色,表示混有血液;呈黄色,表示混有尿液。
3)气味:精液一般无味。鼻子嗅闻。有的带有动物本身固有的气味,如牛、羊精液略有膻味和微汗脂味,猪精液有腥味。若有异味则不正常。;4)PH值:一般为7.0左右。用试纸测定。牛羊精液因精清比例较小呈弱酸性,故PH值为6.5-6.9;猪精液因精清比例较大,故PH值为7.4-7.5。
5)云雾状:牛、羊精子密度大,混浊不透明,如翻腾滚滚的云雾。马、猪的精子少,混浊度也较小,云雾状不显著。假如采取猪的浓份精液,其云雾状也与牛羊相似。
;猪精液的外观检查;精子活力检查
是指在精液中呈直线前进运动的精子数占总精子数的百分率。
制片方法有压片法和悬滴法,载玻片要预热到37℃,放在400倍显微镜下观察,浓度大的精液先用生理盐水或等渗稀释液稀释后检查。
目测评定精子活率,通常采用十级评定法,即按视野中呈直线前进运动的精子数占总精子数的估计百分比评定,100%直线前进运动者评为1.0。;现在可用计算机辅助(CASA)检测精子运动能力。
各种家畜的新鲜精液,精子活率一般在0.7~0.8,用以输精的精液活率,液态保存精液应在0.6以上,冷冻精液在0.3以上。冷冻精液冷冻前应在0.7以上。
;猪精液目测估测法检测活率;牛精子活力检查的程序;精子密度检查
精子密度也称精子浓度,是指每毫升精液中含有的精子数??。目前测定精子密度的方法常采用估测法、血细胞计计算法和光电比色测定法等。
各种动物的精子密度(亿个/ml):牛10(2.5~20);猪2.5(1~3);马1.2(0.3~8);羊30(20~50)。;1)估测法:在显微镜下根据精子分布的稀稠程度,将精子密度粗略地分为“密、中、稀”。
密:精子间隔距离不到一个精子,约10亿/ml;
中:精子与精子的间隔为1-2个精子,约2~10亿/ml;
稀:精子与精子的间距为2个以上精子,2亿/ml以下。;2)血细胞计计算法:通过计算每毫升精液中所含精子数多少来衡量精子的密度。一般采用血细胞计进行。对牛、羊等精子密度高的精液使用红细胞吸管,而对马、猪精子密度低的精液则使用白细胞吸管。
原精液200μL,3%NaCl稀释(猪精液一般稀释10倍、牛精液一般稀释100倍),计数板上放盖玻片,滴上1滴稀释精液,计数5个中方格精子。
1ml原精液内的精子数=5个中方个数的精子数×5×10×1000×稀释倍数(如为原精液则不×稀释倍数)
;;3)光电比色计测定法:是目前评定精子密度一种较准确的方法,适用于牛、羊精液,如果除去精液胶块,也可测定猪、马精液。此法是根据精子越多,精液越浓,其透光率越低的特性,使用光电比色计通过反射光和透光程度来测定精子的密度。
现有精子密度仪专用于测定精子密度,快速而准确。;猪精子密度检测方法;牛精子密度测定程序;精子形态检查
精子形态正常与否对受精率有着密切关系。如果精液中含有大量畸形精子和顶体异常精子,则受精能力就会降低。
1)精子畸形率:精液中形态不正常的精子称为畸形精子,精子畸形率是指精液中畸形精子数占总精子数的百分比。
在各种动物的正常精液,精子畸形率一般不超过20%,牛不得超过18%,水牛不超过15%,羊不超过14%,猪不超过18%,否则不能用于输精。
一般检查方法是做成抹片、固定,伊红或姬姆萨等染色后普通显微镜观察计数。;;畸形精子各种各样,一般可分为四类:
①头部畸形:头部瘦小、细长、缺损、双头等。
②颈部畸形:膨大、纤细、带有原生滴、双劲等。
③中段畸形:膨大、纤细、弯曲、屈折、带有原生滴等。
④主段畸形:弯曲、屈折、缺损、带有原生滴等。
;;猪精子畸形率检测;2)精子顶体异常率:
精子的正常顶体内含有多种与受精有关的酶类,在受精过程中起着重要的作用,因此,精子顶体正常与否和精子存活、受精能力有密切的关系。
顶体异常有顶体膨胀、缺损、部分脱落、全部脱落等。
在正常情况下,牛的顶体异常率不超过5.9%,猪不超过2.3%,如
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