《食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验》培训.docxVIP

2025年食品微生物学检验

2025版单核细胞增生李斯特氏菌培训

01

01简谈“单增李斯特菌”

02

02与2016版相比主要变化

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03第一法定性检验

目录

目

录

04第二法平板计数法

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05第三法MPN法

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06总结修订亮点及标准中操作要点和注意事项

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简谈”单增李斯特菌“

一、什么是单增李斯特菌？

李斯特菌是1926年英国南非裔科学家穆里在病死的兔子体内首次发现的，为纪念手术消毒之父、英国生理学家约瑟夫·李斯特(1827~1912)，1940年被第三届国际微生物学大会命名为李斯特菌。

单核细胞增生李斯特菌（Listeriamonocytogenes，简称单增李斯特菌），是一种重要的食源性致病菌，广泛存在于自然环境中（如土壤、水、腐烂植物），能通过污染食物（如肉及肉制品、奶及奶制品、水产制品等）感染人类和动物。与沙门菌、大肠杆菌O157以及志贺氏菌被WHO列为四大重要食源性病原菌之一。其预防需从食品采购、储存、加工到食用各环节严格把控。

单增李斯特菌有两大特点：一、是潜伏期长，一般为4天至21天，最长可达3个月，因此难以引起人们的警觉；单增李斯特菌一般导致肠道感染，患者会出现发热、肌肉酸疼、恶心、呕吐等症状，几天即可痊愈。它也能入侵神经系统和循环系统，引起严重的脑膜炎和败血症，发病率虽低，病死率却较高。二、是“欺软怕硬”，单增李斯特菌进入人体后是否发病，与菌的毒力和宿主的年龄、免疫状态有关，因此，易感者为新生儿、孕妇及40岁以上的人，此外，酗酒者、

免疫系统损伤或缺陷者、接受免疫抑制剂和糖皮质激素治疗的患者及器官移植者也易被该菌感染。该病的临床表现，健康成人个体出现轻微类似流感症状，新生儿、孕妇、免疫缺陷患者表现为呼吸急促、呕吐、出血性皮疹、化脓性结膜炎、发热、抽搐、昏迷、自然流产、脑膜炎、败血症等症状。

二、基本特性

形态与染色01

形态与染色

01

?形态：革兰氏阳性小杆菌，大小为(0.4-0.5)μm×(1-2)μm，直或微弯，常呈V形成对排列，偶尔可见双球状。无芽胞，无荚膜，在陈旧培养物中或粗糙型菌落的菌体长度可达6-20μm或更长的丝状。

1.生物学特性?染色：幼龄培养呈革兰氏阳性

1.生物学特性

培养特性

?营养需求：营养要求不高，兼性厌氧，最适在含有CO2的微需氧环境中生长。

02?生长温度：生长范围为2-42℃,最适温度为30-37℃,能在普通冰箱冷藏室生长，是一种典型的耐冷性细菌，也有报道在0℃能缓慢生长。

02

?pH值：在pH中性至弱碱性（pH9.6）、氧分压略低、二氧化碳张力略高的条件下生长良好，在pH3.8-4.4能缓慢生长。

?菌落特征：在普通琼脂平板上呈细小直径约0.2-0.4μm、半透明露水样菌落；在血琼脂平板上有β溶血环；在选择性培养基上呈现灰黑色；在显色培养基呈蓝色。

二、基本特性

生化反应

?触酶试验：阳性。

03?动力试验：在20-25℃培养有动力，37℃时动力阴性。

03

?糖类发酵：能发酵葡萄糖、乳糖、水杨素、麦芽糖、鼠李糖、七叶苷、蔗糖（迟发酵）、山梨醇、海藻糖、果糖，不发酵木糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二糖。

?其他反应：氧化酶阴性，不利用枸橼酸盐，40%胆汁不溶解，吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性，VP、甲基红试验和精氨酸水解阳性。

1.生物学

1.生物学特性

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?理化因素：对理化因素抵抗力较强，在土壤、粪便、青储饲料和干草内能长期存活，对碱和盐抵抗力强，60-70℃经5-20min可杀死，70%酒精5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min可杀死此菌。

05?抗生素：对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺均敏感，对头孢菌素天然耐药，对氯霉素、大环内酯类、四环素有一定的耐药性。

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血清型

?根据菌体（O）抗原和鞭毛（H）抗原，将单增李斯特氏菌分成13个血清型，分别是1/2a、1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4b、4ab、4c、4d、4e和“7”。致病菌株的血清型一般为1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、1/2a和4b。

二、基本特性

主要通过污染食物传播，能穿透肠道屏障、胎盘屏障和血脑屏障，引发全身性感染。致死率高，免疫力低下人群死亡率可达20%-30%。

2.致病性该菌可通