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肝功能储备检测操作流程
肝功能储备检测是评估肝脏功能状态、预测肝脏疾病预后及指导临床治疗的重要手段,其操作需严格遵循规范化流程,确保结果准确性与可靠性。以下从检测前准备、具体操作步骤、质量控制、结果分析及注意事项等方面详细阐述整个流程。
一、检测前准备
(一)患者准备
1.空腹要求:受检者需至少空腹8-12小时,避免饮食对血脂、血糖及胆汁酸等指标的干扰。检测前24小时内禁止饮酒,避免高脂、高蛋白饮食,以免影响转氨酶、胆红素等代谢指标。
2.药物管理:提前3天停用可能影响肝功能的药物,如解热镇痛药(对乙酰氨基酚)、抗生素(异烟肼、利福平)、抗癫痫药(苯妥英钠)等。若因基础疾病需长期用药(如抗乙肝病毒药物),需在检测单中注明药物名称及剂量,供结果分析时参考。
3.禁忌评估:对存在严重心肺功能不全、无法配合体位要求(如肝脏弹性成像需仰卧位)、碘过敏史(吲哚菁绿试验禁忌)或凝血功能严重异常(凝血酶原活动度40%)的患者,需谨慎评估检测风险,必要时调整检测方案。
4.信息采集:检测前需核对患者基本信息(姓名、年龄、性别),详细询问病史(肝炎病毒感染史、饮酒史、手术史)、症状(乏力、纳差、黄疸、腹水)及近期治疗情况(如是否接受保肝治疗、人工肝支持),为结果解读提供临床背景。
(二)设备与试剂准备
1.常规实验室设备:需准备全自动生化分析仪(用于检测ALT、AST、总胆红素、直接胆红素、白蛋白等)、凝血功能检测仪(用于检测PT、INR、APTT)、血氨检测仪(酶法或离子选择电极法)及离心机(转速3000rpm,离心10分钟分离血清)。
2.特殊功能试验设备:吲哚菁绿(ICG)清除试验需配备分光光度计(检测波长805nm)、精密计时器及静脉注射器材(2ml注射器、头皮针);肝脏弹性成像(Fibroscan)需使用瞬时弹性成像仪(如Echosens公司的Fibroscan502),配套M、L探头(根据患者体质量指数选择,BMI30用M探头,BMI≥30用L探头);半乳糖清除能力(GEC)试验需高效液相色谱仪或酶标仪。
3.试剂与耗材:生化检测试剂需选择符合国家标准的定量检测试剂盒(如ALT检测采用IFCC推荐的速率法试剂),凝血检测使用枸橼酸钠抗凝管(抗凝剂与血液比例1:9),ICG试剂需避光保存(2-8℃),开封后24小时内使用。所有试剂需在有效期内,使用前检查是否有沉淀、变色等异常。
二、具体操作流程
(一)临床评估
1.病史采集:由临床医生通过问诊获取关键信息,包括:①基础疾病(病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病、自身免疫性肝炎);②症状进展(如黄疸进行性加深提示肝细胞大量坏死);③并发症(肝性脑病、上消化道出血);④治疗干预(如是否接受过肝移植、TIPS手术)。
2.体格检查:重点观察皮肤黏膜(是否有黄疸、肝掌、蜘蛛痣)、腹部体征(肝脾大小、腹水征)及神经系统(扑翼样震颤提示肝性脑病)。腹水评估可通过移动性浊音或超声定位,记录腹围作为动态观察指标。
(二)实验室检测
1.常规生化指标:
-标本采集:使用真空采血管采集静脉血5ml,避免溶血(溶血可导致AST、LDH假性升高)。采血后30分钟内离心,分离血清或血浆,2小时内完成检测(延迟检测可能导致胆红素氧化、血糖降低)。
-检测项目与方法:
-转氨酶(ALT、AST):采用速率法,反应温度37℃,主波长340nm,次波长405nm,检测范围0-1000U/L。
-胆红素(TBil、DBil):重氮法,TBil检测需避光,避免光照分解;DBil通过加速剂(如咖啡因)促进结合胆红素反应。
-白蛋白(Alb):溴甲酚绿法,pH4.2缓冲液环境下,白蛋白与溴甲酚绿结合形成蓝绿色复合物,检测波长630nm。
-γ-谷氨酰转移酶(GGT):速率法,底物为L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺,检测波长405nm,反映胆管损伤。
2.合成功能指标:
-凝血功能:采集枸橼酸钠抗凝全血2ml,颠倒混匀5次,避免凝血。使用凝固法检测PT、INR,仪器通过光学法或磁珠法监测纤维蛋白形成时间。INR计算公式为患者PT/正常对照PT的ISI次方(ISI为国际敏感指数,由试剂提供)。
-前白蛋白(PA):免疫透射比浊法,血清前白蛋白与抗前白蛋白抗体结合形成复合物,检测波长340nm,半衰期短(约2天),更敏感反映近期肝脏合成功能。
3.代谢功能指标:
-胆汁酸(TBA):酶循环法,3α-羟类固醇脱氢酶催化胆汁酸生成3-酮类固醇,同时NAD+还原为NADH,检测340nm吸光度变化,
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