多杀菌素发酵与纯化工工艺的关键技术分析.pdfVIP

总第232期山西化工Total232

2025年第3期ShanxiChemicalIndustryNo.3,2025

科研与开发D0I:10.16525/j.cnki.cn14-1109/tq.2025.03.019

多杀菌素发酵与纯化工工艺的关键技术分析

张小凤，刘峰，倪为贵*

（山东合成远景生物科技有限公司公司，山东潍坊262500）

摘要：为提升多杀菌素合成效率，对其发酵阶段的酵参数的优化、氧传递效率提升、代谢流调控以及生物反应器在

线监测进行优化，并对提取与纯化阶段的细胞破碎、溶剂萃取、层析分离、色谱精制等关键条件进行试验分析，结果

显示：发酵阶段采用碳氮比为14.0、DO值为50%、搅拌400r/min、通气1.5VVM条件下，EtOAc-AcN萃取体系提

高目标产物回收率至85.6%,HILIC柱层析结合HPLC精制使最终纯度达97.2%总回收率提升至90.5%。优化工艺

具有良好的稳定性，可以进一步放大实验。

关键词：多杀菌素；发酵；纯化；工艺技术

中图分类号：TQ920.6;TQ450.6文献标识码：A文章编号：1004-7050(2025)03-0056-02

0引言表1种子培养基与发酵培养基成分及配比

多杀菌素是一种高效、低毒的生物农药,广泛应单位：g/L

用于农业害虫防控。陈润杰等[1]研究了多杀菌素高产成分种子培养基发酵培养基作用说明

葡萄糖2025碳源，提供能量

菌株的诱变及发酵优化，探讨了碳氮比及溶氧条件对

蛋白陈5一氮源，促进生长

产量的影响。刘之豪等[2针对多杀菌素生产过程中的

酵母粉5一维生素与微量元素

副产物处理及资源化利用进行了研究，提出优化工艺玉米浆一10复合氮源，提高代谢活性

以提高整体生产效率。张凯等[3]概述了生物农药乙基豆粮一15复合氮源，调节pH

多杀菌素的研究进展,指出发酵过程控制及分离纯化NaCl22渗透压调节

技术对提高产品质量和回收率的关键作用。本文通过MgSO47H,O0.50.5细胞代谢辅助因子

优化氧传递及智能补料策略，提高多杀菌素合成效用SephadexLH-20凝胶过滤层析柱(GEHealthcare），

率,采用EtOAc-AcN萃取结合HILIC层析，提高回收流动相为甲醇－水（体积比70：30）。定量分析使用

率及产品纯度，并结合在线监测及智能控制优化发酵Agilent1260InfinityHPLC系统，配备ZORBAXEclipse

参数，提高生产稳定性，为工业化生产提供技术支持。PlusC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为

1实验与方法甲醇－水（体积比65：35）,检测波长235nm,进样体

1.1实验材料与仪器积10μL。

本研究选用的多杀菌素生产菌株为Saccharo-1.2实验方法与设计

polysporaspinosaATCC49460，购自美国典型培养物实验采用标准的微生物发酵及生物分离纯化流

保藏中心（ATCC)。菌株的活化和保藏均在ISP