7第十七章-抗生素-十九章-药物的抗菌实验-二十章药品的微生物学质量控制.pptVIP

微生物在药学中的应用

I.抗生素

Antibiotics:是生物（包括微生物、植物和动物）在生命活动过程中产生的（或其他方法获得），能在低微浓度下有选择性地抑制或影响它种生物机能的有机物质。

一、抗生素分类

根据生物来源分

细菌产生：绿脓菌蓝素、多粘菌素、杆菌肽

真菌产生：头孢菌素

放线菌产生：链霉素、四环素、红霉素

高等植物产生：蒜素、地衣酸

动物产生：红细胞素

根据作用对象分

抗G+、G-、广谱、抗真菌、抗病毒、抗原虫、抗肿瘤

根据化学结构分

-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、多烯类、多肽类、苯烃基胺类、蒽环类、其他

二、抗生素的分离和筛选

以从土壤中分离放线菌为例

从土壤中分离放线菌（初筛）

采土：较干燥、偏碱性、有机质丰富的土壤

（取5-10厘米深处）。

分离放线菌：土壤样品用无菌水稀释，获得

菌悬液，梯度稀释，选取不同稀释度接种适

宜培养基，获得单菌落纯培养。

筛选：斜面→摇瓶→琼脂扩散法、滤纸片抗菌试验（G-，G+）。

流程图

土壤标本

涂布于平板培养基培养

无菌水稀释

挑取单菌落

扩培

培养观察抑菌圈

鉴定

精制

临床研究

滤纸片

法筛选

抗生素效价单位(unit,u)

重量单位（生物活性部分重量）：1µg≌1U

类似重量单位（特定抗生素盐纯品重量）

1µg≌1U

重量折算单位（原始活性单位相当的纯品重量为1U）

ex:Pen0.5988µg≌1U,1mg≌1670U

特定单位（特定样品的某一重量为一定单位）

Ex:一批特定杆菌肽1mg≌55U

四、抗生素的体外抗菌实验

MIC——最低抑菌浓度

MBC——最低杀菌浓度

KCS——杀菌曲线

五、药物制剂的微生物检查

1、微生物与药物变质

空气

含细菌、霉菌、酵母等。

除菌—过滤、化学消毒、UV照射。

水—大肠杆菌通常作为水是否被粪便污染的检验指标

人体

皮肤

与外界相通的腔道

正常菌群/条件致病菌（E.coli，绿脓，沙雷氏菌）

原材料

动物脏器

中药材—晾晒、烘烤

包装物

制药设备、厂房建筑、死角管道

人流、物流

2、无菌制剂的无菌检查

无菌检查的基本原则

三种培养基（需氧培养基、厌氧培养基和真菌

培养基），按药典的规定程序进行。

a、一般药品的无菌检查—直接接种法

需氧菌、厌氧菌、霉菌的检查

需氧菌：30-35℃，7天

厌氧菌：30-35℃，7天

霉菌：20-25℃，7天

观察培养液是否混浊或涂片染色镜检

阳性对照—（24h有菌生长）

金葡CMCC（B）26003

生孢梭菌CMCC（B）64941

白色念珠菌CMCC（F）98001

b、口服药及外用药的限度检查法

一、细菌总数的测定

二、霉菌和酵母菌总数的测定

三、控制菌的检查

口服药—不能检出大肠杆菌

脏器来源口服制剂—不能检出沙门氏菌、大肠杆菌。

外用药、眼科制剂—不能检出金葡菌、绿脓杆菌。

控制菌指的是大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及破伤风梭菌。

四、活螨的检查

*举例－大肠杆菌的检查

E.coli增菌液—胆盐乳糖培养基

分解乳糖，紫黑色金属光泽菌落

形态结构—G-，短杆菌

菌落特征

IMVIC：++--

药品的微生物限度标准